NK92 CD56流式分析

cancan

实验室从其他实验室借的NK92。培养过程中被告知细胞株有问题不表达CD56，取样流式检测后发现CD56+是很少。但不知道是什么原因样品会分群？阴性对照正常没分群。

家的感觉

应该是细胞状态的问题吧，有学生做凋亡的时候，细胞状态不好或有中晚期凋亡，就会在P1群左侧偏上有一小群。你看一下你的两个细胞状态有没有明显的区别，消化过度或吹打力度太大可能会导致细胞状态不好，例如这三个图片是同样的细胞，由于药物处理或人为操作等原因引起细胞状态不同（以上是我个人看法，不一定正确，仅供参考）。

cancan

家的感觉 发表于 2016-6-13 08:48
应该是细胞状态的问题吧，有学生做凋亡的时候，细胞状态不好或有中晚期凋亡，就会在P1群左侧偏上有一小群。 ...

两组细胞是同一组细胞，离心后分成的两份，也会有这种情况吗？

niwanmao

@家的感觉  说的对，那部分FSC偏小、SSC偏大的是死细胞

cancan

niwanmao 发表于 2016-6-13 13:22
@家的感觉  说的对，那部分FSC偏小、SSC偏大的是死细胞

老师,还有一点不明白的是 为什么没加荧光抗体的时候没怎么分开，加过荧光抗体后就很明显的分开了呢？

家的感觉

cancan 发表于 2016-6-13 18:00
老师,还有一点不明白的是 为什么没加荧光抗体的时候没怎么分开，加过荧光抗体后就很明显的分开了呢？ ...

同一组细胞分成两份应该是一样的状态。如果加荧光抗体分开而没加荧光没分开，应该是由于加抗体的细胞在离心洗涤等操作的影响

niwanmao

cancan 发表于 2016-6-13 18:00
老师,还有一点不明白的是 为什么没加荧光抗体的时候没怎么分开，加过荧光抗体后就很明显的分开了呢？ ...

跟加不加荧光抗体无关，尽管是同一份细胞分的，但是处理手法上的差异，有时候结果也会相差比较大。

cancan

niwanmao 发表于 2016-6-14 13:34
跟加不加荧光抗体无关，尽管是同一份细胞分的，但是处理手法上的差异，有时候结果也会相差比较大。 ...

谢谢老师耐心解答。

cancan

家的感觉 发表于 2016-6-14 12:48
同一组细胞分成两份应该是一样的状态。如果加荧光抗体分开而没加荧光没分开，应该是由于加抗体的细胞在离 ...

谢谢老师耐心解答

niwanmao

cancan 发表于 2016-6-13 18:00
老师,还有一点不明白的是 为什么没加荧光抗体的时候没怎么分开，加过荧光抗体后就很明显的分开了呢？ ...

我再看了下你后面那个图，总觉得不单纯是细胞状态的问题，感觉仪器液路不稳定也有点关系。