求分析下凋亡图

lycansoul

最近用流式做凋亡（Annexin V -APC  PI）结果总感觉不对，不知道哪里调错了，请各位战友、老师分析下。
慢病毒转染细胞绿色荧光，用APC PI双染

附件里面是LMD文件. 不知道软件出什么错了（Beckman Coulter的机器），不能导出 FCS文件。LMD   fLOWJO可以打开。

具体问题：
1.quad门的那个图 细胞都是一团，感觉没怎么分开，门从中间分开，这个行吗?
2.是不是门没设好，总感觉怪怪的？数据也貌似不对。哪里出错了呢？

先谢谢各位老师、战友指点。

niwanmao

用Flowjo打开了其中一个对照组的LMD文件，一切换到FL3和FL6，就看到几乎所有数据点都压轴，于是把坐标切换成Biexp，结果发现这完全是FL3-FL6补偿调得太大的缘故嘛，把补偿调小一点就OK了。

lycansoul

niwanmao 发表于 2016-7-5 21:39
用Flowjo打开了其中一个对照组的LMD文件，一切换到FL3和FL6，就看到几乎所有数据点都压轴，于是把坐标切换 ...

谢谢倪老师，下次试试。