我该把十字门放在哪里？

niwanmao · 发表于 2016-7-7 20:29:04

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单色实验

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多色实验
多色实验就相对比较复杂了，因为除了抗体的非特异性结合外，还会发生荧光渗漏，颜色越多，渗漏引起的背景就越重要。

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yuanli · 发表于 2016-7-8 16:30:14

倪老师：您说的，单色实验中生物学阴性对照来设门，就是只用不表达该抗原的细胞做阴性对照？还是说需用这珠不表达该抗原的细胞加抗这种抗原的荧光抗体来做阴性对照呢？

niwanmao · 发表于 2016-7-8 16:38:11

yuanli 发表于 2016-7-8 16:30
倪老师：您说的，单色实验中生物学阴性对照来设门，就是只用不表达该抗原的细胞做阴性对照？还是说需用这珠 ...

是的。

yuanli · 发表于 2016-7-8 16:42:05

niwanmao 发表于 2016-7-8 16:38
是的。

是指的只用空白细胞不需要加抗体么？

niwanmao · 发表于 2016-7-9 09:46:47

yuanli 发表于 2016-7-8 16:42
是指的只用空白细胞不需要加抗体么？

用不表达该抗原的细胞＋抗体

yuan743561169 · 发表于 2016-9-14 17:45:04

老师，你文章最后这段“最后强调一句，如果你做的是淋巴细胞上CD4、CD8等或者其它细胞上阴性、阳性分群十分明显的抗原，不需要设置FMO对照或同型对照，因为本身就存在良好的内对照。”中，内对照是指的什么啊？

niwanmao · 发表于 2016-9-14 18:29:01

yuan743561169 发表于 2016-9-14 17:45
老师，你文章最后这段“最后强调一句，如果你做的是淋巴细胞上CD4、CD8等或者其它细胞上阴性、阳性分群十分 ...

内对照就是细胞群内同时存在CD4－和CD8－的细胞，所以就可以用这些细胞设门。像我们在平时免疫分型时，淋巴细胞的标记，就用粒细胞设门，因为粒细胞不表达这些淋巴标记。

DFL · 发表于 2018-3-14 01:08:13

请问老师，为什么这个门要划在曲线相交的地方？

niwanmao · 发表于 2018-3-14 10:31:17

DFL 发表于 2018-3-14 01:08
请问老师，为什么这个门要划在曲线相交的地方？

这本书的图属于极端的，比例上不是很好。
实际情况，你门内的细胞个数一定要获取到足够量，尽量在1万以上，然后看FMO对照或生物学阴性对照的位置，并且一定一定要用散点图设门。

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