流式检测细胞表面抗原

Emily1111 · 发表于 2016-7-9 11:04:07

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流式检测细胞表面抗原，死细胞要收集吗？

luzhufeng · 发表于 2016-7-9 15:48:19

当然是选取活细胞啦

Emily1111 · 发表于 2016-7-9 16:21:15

luzhufeng 发表于 2016-7-9 15:48
当然是选取活细胞啦

要看处理过药物的细胞的表面抗原的变化，死细胞表面抗原变化会大些，担心活细胞对比不明显，纠结ing.....

niwanmao · 发表于 2016-7-9 19:01:39

Emily1111 发表于 2016-7-9 16:21
要看处理过药物的细胞的表面抗原的变化，死细胞表面抗原变化会大些，担心活细胞对比不明显，纠结ing..... ...

死细胞由于胞膜破坏，所以会存在十分明显的非特异性结合，因此必须要用活细胞。如果对比不明显，说明课题原来的设想是不正确的。不能为了迎合结果而做实验。

Emily1111 · 发表于 2016-7-15 17:42:43

间接法检测细胞表面的DR5蛋白，一抗二抗至少需要多少浓度呀？

Emily1111 · 发表于 2016-7-15 17:44:42

niwanmao 发表于 2016-7-9 19:01
死细胞由于胞膜破坏，所以会存在十分明显的非特异性结合，因此必须要用活细胞。如果对比不明显，说明课题 ...

间接法检测细胞表面的DR5蛋白，一抗二抗至少需要多少浓度呀？

niwanmao · 发表于 2016-7-15 21:12:10

Emily1111 发表于 2016-7-15 17:44
间接法检测细胞表面的DR5蛋白，一抗二抗至少需要多少浓度呀？

这个最难回答，是你们自己制备的单抗还是购买的？如果是购买的，只需摸索最佳用量即可。

Emily1111 · 发表于 2016-7-15 21:50:35

niwanmao 发表于 2016-7-15 21:12
这个最难回答，是你们自己制备的单抗还是购买的？如果是购买的，只需摸索最佳用量即可。 ...

我们买的adcam的抗体，就是您晓得一般做这个实验需多少浓度，谢谢

niwanmao · 发表于 2016-7-16 08:23:54

Emily1111 发表于 2016-7-15 21:50
我们买的adcam的抗体，就是您晓得一般做这个实验需多少浓度，谢谢

需要进行抗体滴定，具体如何滴定，可搜索站内的“抗体滴定”

Emily1111 · 发表于 2016-8-12 13:02:46

niwanmao 发表于 2016-7-16 08:23
需要进行抗体滴定，具体如何滴定，可搜索站内的“抗体滴定”

像这种间接染色，如何确定结合是否饱和？

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