细胞周期分析结果求助

shangshanruoshu

新手第一次做流式细胞仪分析细胞周期，求助大神帮忙看下分析的是不是有问题？

niwanmao

分析问题不太大，只是标本粘连比较明显。

shangshanruoshu

niwanmao 发表于 2016-8-3 10:58
分析问题不太大，只是标本粘连比较明显。

谢谢老师的回复，请问老师1. 图中那部分是样品的粘连比较明显的地方？怎样减少样品的粘连？
                                          2. FSC-A/SSC-A和PI-W/PI-A两个图我圈的门合适吗？
                                           3. 异倍体峰的位置套在了G2峰中，这个位置有问题吗？
                                           4. 同一样品每次圈门，得到的结果都不一样，怎样保证结果的正确性和准确度？

niwanmao

shangshanruoshu 发表于 2016-8-3 11:06
谢谢老师的回复，请问老师1. 图中那部分是样品的粘连比较明显的地方？怎样减少样品的粘连？
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你用的是自动拟合吧？你用的细胞是二倍体细胞还是存在异倍体细胞？

shangshanruoshu

niwanmao 发表于 2016-8-3 15:24
你用的是自动拟合吧？你用的细胞是二倍体细胞还是存在异倍体细胞？

老师，是用的自动分析，我用的是转基因植株的叶片，我也不确定转基因后植株是否会出现异倍体细胞，我用手动分析后异倍体峰就没有了，老师我现在不确定是不是我分析不准确造成这种情况出现，还是我的转基因植株叶片细胞确实存在异倍体峰？

niwanmao

shangshanruoshu 发表于 2016-8-3 16:15
老师，是用的自动分析，我用的是转基因植株的叶片，我也不确定转基因后植株是否会出现异倍体细胞，我用手 ...

一般建议用Manual模式分析会好一些。动物标本可用鸡红细胞做倍体参照，但植物我就不知道有没有倍体可参照了。
我的建议是，需要先确定该植株是否会出现多倍体，从你的图上看，感觉应该是存在一个4倍体小峰，此时，手工分析需要选择两个cycle就能拟合出来。只有确定好2倍体还是多倍体，才能进行正确的分析。

防止粘连的诀窍是：将新鲜标本充分混匀后，用吸管逐滴滴入振荡中的70％乙醇中，会效果好一点。

shangshanruoshu

niwanmao 发表于 2016-8-3 18:06
一般建议用Manual模式分析会好一些。动物标本可用鸡红细胞做倍体参照，但植物我就不知道有没有倍体可参照 ...

老师，自动分析和手动分析的运行参数有哪些差异，为什么同一样品两种分析方法差异会很大？

niwanmao

shangshanruoshu 发表于 2016-8-4 12:08
老师，自动分析和手动分析的运行参数有哪些差异，为什么同一样品两种分析方法差异会很大？ ...

哪些参数我不太清楚，但是我个人比较喜欢手动分析，因为只有我们人自己对比较会比较了解，计算机去自动拟合终归是不太智能。

shangshanruoshu

niwanmao 发表于 2016-8-4 12:38
哪些参数我不太清楚，但是我个人比较喜欢手动分析，因为只有我们人自己对比较会比较了解，计算机去自动拟 ...

好的，谢谢老师

shangshanruoshu

niwanmao 发表于 2016-8-4 12:38
哪些参数我不太清楚，但是我个人比较喜欢手动分析，因为只有我们人自己对比较会比较了解，计算机去自动拟 ...

老师，CV值太高是什么原因，都达到16了？