流式细胞仪操作

静圆芳

刚接触流式，先说一下我的操作步骤，我做的是FITC-PI测凋亡的试剂盒，是先用微球校正仪器，之后将双染后的空白样品、给药样品依次上样检测，但是结果感觉不理想，看网上有关于荧光补偿的设置，这里有几个问题想问一下：
     1、怎么设置荧光补偿，是根据微球测出的散点图设置吗，具体该怎么操作
     2、怎么设门，这个是需要在微球检测的时候设好吗，设好后直接Scan下一个样品吗？
     3、关于十字门的设定怎么确定十字中心？
     4、横坐标的那个值为什么那么大
因为实验室新买的流式，之前没有人做过，第一次碰，啥都要摸索，提的问题可能有点不对劲，各位见谅！
以下是我做的一个空白样品的图，不知道圈的对不对，请各位指导一下，谢谢了

niwanmao

你们是什么仪器？C6？

静圆芳

niwanmao 发表于 2016-9-19 17:02
你们是什么仪器？C6？

是handyem HPC150 第二代个人流式细胞仪,迷你型的一台机器

niwanmao

静圆芳 发表于 2016-9-19 18:03
是handyem HPC150 第二代个人流式细胞仪,迷你型的一台机器

非主流机器就是存在这种兼容性问题

你可以调整坐标轴范围，如果调不好，试着把原始数据传一个上来我们看看。

静圆芳

这是做的一个样品的双染结果,感觉不好

静圆芳

niwanmao 发表于 2016-9-19 18:13
非主流机器就是存在这种兼容性问题

你可以调整坐标轴范围，如果调不好，试着把原始数据传一个上来我们 ...

上传了,不知道为什么横坐标为什么那么大,我看很多人做的都是在10e1附近

chymanhz

静圆芳 发表于 2016-9-19 18:03
是handyem HPC150 第二代个人流式细胞仪,迷你型的一台机器

这机器当心不要堵了，评价不怎么好啊，还有别的仪器吗？

静圆芳

chymanhz 发表于 2016-9-19 19:51
这机器当心不要堵了，评价不怎么好啊，还有别的仪器吗？

学校条件有限,刚买的这个机器,才开始用,摸索中~

niwanmao

静圆芳 发表于 2016-9-19 18:51
这是做的一个样品的双染结果,感觉不好

确实不正常，线性显示这样的：


LOG模式显示这样的：


你有没有试过在他们随机附带的软件上显示是不是这样的？我看他们的数据结构没有特殊啊。

PS：这款小仪器多少钱？

静圆芳

不晓得这个多少钱，学校买的，我只是个小学生～～这是我从仪器上截的图，老师，这种情况是怎么回事呢，是我没调补偿的原因吗