应用流式检测细胞活性氧（ROS）结果怎么分析？

磊子-梦醒十分

下图是通过流式细胞术检测ROS的图，用的是DCFH-DA试剂，但不知道结果具体怎么分析？麻烦各位老师帮忙看看！
1.图中有两个峰是否正常？
2.M1和M2这样标是否不妥，应该怎么标合适？
3.应该读取哪个数据值，Mean、Geomean还是%Gated?

niwanmao

参考一下：
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1477-1-1.html
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2155-1-1.html


我个人觉得你这个结果挺好的啊，两个峰的话从中间设门即可。你目前的位置是根据阴性对照设的吗？

磊子-梦醒十分

倪老师，你说的阴性对照就是不加探针的正常细胞吗？

对照组

实验组

上图是对照组，下图是实验组，M1、M2这样标对吗？分析结果时是读取M2的%Gated吗，倪老师？

niwanmao

磊子-梦醒十分 发表于 2016-9-23 08:20
倪老师，你说的阴性对照就是不加探针的正常细胞吗？
上图是对照组，下图是实验组，M1、M2这样标对吗？分析 ...

我个人认为应该按照下面红色门这样子，因为加了探针之后，可能会出现阴性群的背景荧光增强，所以还是需要按照峰的分隔设门会好一些。

han7525

niwanmao 发表于 2016-9-22 19:31
参考一下：
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1477-1-1.html
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2155-1- ...

老师您好，我最近刚开始做流式测ROS，用的DCFH-DA，也遇到上面的情况，想请您帮忙看看。
1、图1中应该选FSC-H,SSC-H还是FSC-A,SSC-A？当时测的老师给我用FSC-A测的。
2、图2是只有细胞的样品，用来调仪器参数。
3、图3是对照组细胞，出现双峰是什么原因，会不会是探针没有洗干净？这个结果是不是不正常哦，还有从中间设门可以吗？4、图4红色是正常组，蓝色是给药组，是不是说明ROS降低了？