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[流式相关软件] 单阳管染色问题

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发表于 2016-9-25 22:12:36 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
我设置的单阳管,用Flowjo设补偿,这两个单阳管是不是没染上啊?

APC0.fcs.PNG
APC1.PNG
PACIFIC_BLUE0.PNG
PACIFIC_BLUE1.PNG
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发表于 2016-9-26 09:17:16 | 显示全部楼层
这两个标记确定在淋巴细胞上阳性表达?如果不是的话,可能需要选择补偿微球。
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 楼主| 发表于 2016-9-26 10:07:34 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-9-26 09:17
这两个标记确定在淋巴细胞上阳性表达?如果不是的话,可能需要选择补偿微球。 ...

倪老师,APC标记的是CD25,Pecific Blue标记的是CD127,都是在淋巴细胞上表达的。那我这个是没有标记上吗?
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2016-9-26 15:00:40 | 显示全部楼层
无邪 发表于 2016-9-26 10:07
倪老师,APC标记的是CD25,Pecific Blue标记的是CD127,都是在淋巴细胞上表达的。那我这个是没有标记上吗 ...

这两个标记刚好都是分群不好的。我建议你要么用补偿微球,要么购买两个CD3,一个APC标记,一个PB标记,用CD3来调节补偿,这是可以的。

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发表于 2016-9-28 14:50:46 | 显示全部楼层
对,这确定有阳性表达吗?或是弱表达,没有很明显的双峰,只是部分偏移,这就可以通过对照组做个叠加图,看看效果。还有若只是单染,还有必要做荧光补偿吗!!!
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发表于 2016-9-28 16:13:31 | 显示全部楼层
我只知道你只测这两管你是划分不出来的,就算有阳性,你也不知道是哪一群,我们测得调节T都是同时加测CD4,就是做一管CD4和CD25,然后测的是双阳的比例,没有单独测过CD25的,我看了一下,应该是有阳性的,但是没有经验的人是划分不出来的
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 楼主| 发表于 2016-9-29 20:12:09 | 显示全部楼层
特勒兮兮 发表于 2016-9-28 16:13
我只知道你只测这两管你是划分不出来的,就算有阳性,你也不知道是哪一群,我们测得调节T都是同时加测CD4, ...

测了CD4的,这是其中的两个单阳管,分群不好
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发表于 2016-10-6 11:43:51 | 显示全部楼层
无邪 发表于 2016-9-29 20:12
测了CD4的,这是其中的两个单阳管,分群不好

我们测了CD4的也有大部分分群不明显,但是测得多了,也还有有一部分分群是比较明显的,所以那些分不出来的只能按照经验来分了
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 楼主| 发表于 2016-10-6 16:19:42 | 显示全部楼层
特勒兮兮 发表于 2016-10-6 11:43
我们测了CD4的也有大部分分群不明显,但是测得多了,也还有有一部分分群是比较明显的,所以那些分不出来 ...

好的,谢啦
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发表于 2016-10-6 20:05:58 | 显示全部楼层
Plot_A09_59960.png 这个是我的图片,第二通道是PE染色的吃的127
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