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电压调多少，谁能说的好？
初探流式，了解了流式原理之后，接下来就是试着按照Protocol处理标本，上机了。那么上机第一步就是调节仪器的电压。
其实，关于电压的优化，需要澄清一些陈旧的概念。
最最常见的一个概念就是很多人习惯把电压设置在使空白细胞都缩在第一个数量级内的水平，如下图这样，他们认为必须要这样才是调整好了电压。
应该说，这样的调节对于某些结果不会特别大，但由于电压并非最优，忽略了PMT的线性和范围，也忽略了不同电压下，荧光染料的效能也会不同，所以会出现某些结果欠佳。
为什么说不同电压下，荧光染料的表现会不同呢？以Alexa Fluor680为例，这种荧光应该在红光、710nm滤光片下测得最强荧光信号，但这种情况是基于电压优化的情况下。
如果绿色激光和红色激光的电压均未得到优化，那么就可以使PE-cy5的荧光大量渗漏到710nm滤光片，甚至超过Alexa Fluor680本身的亮度，形成如下图所示的结果，最后导致补偿会超过100％。
虽然说补偿超过100％也不是不能用，但会使实验更容易出问题，方案设计会变得更复杂。
那么就回到正题了，应该怎么优化电压呢？
今年的6月21日，我们在论坛和微信上推送了ISAC年会的一个PPT《教你调节电压》（http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5235-1-1.html或微信历史记录往前翻），给大家介绍了几个要点：
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发表于 2016-10-26 20:28:52
发表于 2018-12-14 08:31:41
