这俩染料需要调节补偿么？

ps654321

7-AAD和APC，检测机器参数7-AAD用PerCP(EX:488nm   filters：675/30)通道检测  ，APC(EX:640nm   filters：675/30)通道检测（filters就是相同的）看了下荧光光谱：
488NM

640NM

机器上这俩个是不同的通道。请问这还需要调节补偿么？

niwanmao

很小，因为两者激发光不一样，所以他们会在不同光路上。

ps654321

niwanmao 发表于 2016-11-7 08:39
很小，因为两者激发光不一样，所以他们会在不同光路上。

溢漏小，那不同光路是否需要调节补偿？

sunzheng_99

就是说你所说的两种 补偿会很小  可以不用补偿

ps654321

sunzheng_99 发表于 2016-11-7 11:10
就是说你所说的两种 补偿会很小  可以不用补偿

更关注的是对于多小的百分比就不需要做补偿？有相关文献记载么。
另外不同光路间是否存在荧光溢漏？

niwanmao

ps654321 发表于 2016-11-7 09:47
溢漏小，那不同光路是否需要调节补偿？

这两个通道我们平时都在用，几乎没有补偿，要找文献肯定也找的到，就是比较麻烦。
像PerCP和PE之类的为什么会有补偿，就是因为他们在同一光路上面，是从488nm激发后同一束光依次反射分出来的，所以需要调节补偿。而APC488nm激发不了，是640激发的，所以是另一条路走的。

jiangmeng

niwanmao 发表于 2016-11-7 18:17
这两个通道我们平时都在用，几乎没有补偿，要找文献肯定也找的到，就是比较麻烦。
像PerCP和PE之类的为什 ...

老师您好，有没有颜色配对不需要做补偿的相关的文献或者资料。
如果这样的话，尽量选择这样的搭配就会省很多事情。

niwanmao

jiangmeng 发表于 2016-12-1 18:59
老师您好，有没有颜色配对不需要做补偿的相关的文献或者资料。
如果这样的话，尽量选择这样的搭配就会省 ...

FITC和APC
紫光通道和FITC
紫光通道和APC
………

jiangmeng

niwanmao 发表于 2016-12-1 19:30
FITC和APC
紫光通道和FITC
紫光通道和APC

谢谢老师。
老师还有个问题请教一下，我想在一个标本里面加入六个抗体做流式，但是我只需要分析单种颜色，不需要结合起来分析。
这个时候我是不是可以不用做补偿？还有这几种抗体的同型对照抗体可不可以加在一起？
这种情况有什么该注意的？还有应该设置哪些对照？

niwanmao

jiangmeng 发表于 2016-12-6 23:48
谢谢老师。
老师还有个问题请教一下，我想在一个标本里面加入六个抗体做流式，但是我只需要分析单种颜色 ...

1、不管分析几个标记，只要在一管内，并且荧光光谱之间存在重叠，就需要调节补偿。
2、你这个已经属于多色实验了，建议在进行FcBlock之后，用FMO对照设门，不要用同型对照。你可站内搜索“同型对照”查找相关知识恶补一下。