〖破案〗第4期：同样标本同样抗体同样坐标，图形却不一样

niwanmao

新手YYY出现了一个新烦恼，他说我看到了XXX的例子，所以我吸取了教训，特别注意了坐标，但是我两个同样的标本，标记相同的抗体，坐标也调节一致了，图形却还是不一样（如下图）：


为什么会这样呢？
聪明的福尔摩斯和柯南们，再次请你出手，帮一下YYY吧！
新手总是要不断经历各种怪问题才会成长，勇敢挑战一下。
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happyeday

不知道是什么仪器测的。我首先想到的是两次的电压不同。

happyeday

答案呢？

家华同学

同求答案

niwanmao

@happyeday   @家华同学  
不好意思，光在微信平台上发答案，忘记在这个帖子发了。
答案就是第二图是破膜以后的图，所以表面标记发生了明显的偏移，这在现有破膜剂上十分常见的现象。

happyeday

谢谢倪老师。这就是说破膜后表面的标志的荧光也会发生变化？是因为这个实验随后也有一些膜内抗原需要标记，所以破膜？

niwanmao

happyeday 发表于 2016-11-30 08:45
谢谢倪老师。这就是说破膜后表面的标志的荧光也会发生变化？是因为这个实验随后也有一些膜内抗原需要标记， ...

是的。我们最近研发了一种破膜剂，对表面标记影响较小，而且破膜效果好，很快就会和大家见面。

happyeday

这个太好了！破膜的效果对于细胞内标记的检测很重要。希望可以快点面世。

zhenlai_zhu

niwanmao 发表于 2016-11-28 21:59
@happyeday   @家华同学  
不好意思，光在微信平台上发答案，忘记在这个帖子发了。
答案就是第二图是破膜以 ...

是第二张图是破膜后的吗？一般不是破膜后荧光强度下降吗？第二个图的整体荧光强度较第一张图升高了（若是在同等电压的条件下），而且阴性群（没有带有荧光素抗体的结合的细胞）的荧光强度不会在破膜后发生这么大的改变。
我倒是觉得这两张图是因为电压不一样造成的，即使是用一次上机也可能是机器的电压不稳定造成的

niwanmao

zhenlai_zhu 发表于 2016-12-9 09:45
是第二张图是破膜后的吗？一般不是破膜后荧光强度下降吗？第二个图的整体荧光强度较第一张图升高了（若是 ...

破膜以后荧光增强的多见，尤其是cyCD3你可以注意一下看看。