双激光的BD calibur 能测4色，可否同时测5个marker

新武器

双激光的BD calibur 能测4色，可否同时测5个marker。 比如要测cd3、cd4、cd8、cd19、cd5，
cd19标pe，cd8也标pe，通过选cd3-fitc阳性群，把cd8分出来。

niwanmao

当然可以。

新武器

那样补偿怎么调节，随便用一种pe来调节，还是所有pe混到一起？

niwanmao

新武器 发表于 2016-11-24 14:40
那样补偿怎么调节，随便用一种pe来调节，还是所有pe混到一起？

一种表达量高的PE抗体调节即可。

jiangmeng

niwanmao 发表于 2016-11-23 18:08
当然可以。

老师，一个样本不能标带同样颜色的两种抗体吧？

niwanmao

jiangmeng 发表于 2016-12-21 03:56
老师，一个样本不能标带同样颜色的两种抗体吧？

只要你逻辑上能够区分开就行啊，例如你正常淋巴细胞中，肯定不会有一种细胞同时带lambda和CD4的，那么就可以将这两种抗体用同一种标记，例如FITC，当你圈中CD3＋细胞时，如果FITC有阳性，就说明肯定是CD4 FITC阳性，而圈中CD19＋细胞时，如果FITC出现阳性群，就说明肯定是lambda FITC阳性。

jiangmeng

niwanmao 发表于 2016-12-21 08:22
只要你逻辑上能够区分开就行啊，例如你正常淋巴细胞中，肯定不会有一种细胞同时带lambda和CD4的，那么就 ...

明白了，前提是必须有办法能够区分开来的情况下。
还有老师我想请教一个问题，像贴壁细胞怎么制作成单细胞悬液对抗原损害比较小又能获得比较多的细胞？胰酶消化？机械刮脱？您有没有这方面的经验？

niwanmao

jiangmeng 发表于 2016-12-21 10:07
明白了，前提是必须有办法能够区分开来的情况下。
还有老师我想请教一个问题，像贴壁细胞怎么制作成单细 ...

没有经验，我们平时做的基本上都是血液系统的悬浮细胞，临床上处理的骨髓为主，其次是组织标本研磨（用魔滤）。

Justin-威

niwanmao 发表于 2016-12-21 11:26
没有经验，我们平时做的基本上都是血液系统的悬浮细胞，临床上处理的骨髓为主，其次是组织标本研磨（用魔 ...

倪老师，您那边有没有一些组织标本研磨后做出来的流式散点图啊，不需要知道是用的什么抗体，就只需要看到不同的组织跑出来后细胞分群的形态就可以了，最近要做组织样本，想找个参考。我的邮箱是wei5452830@163.com,谢谢

niwanmao

Justin-威 发表于 2016-12-30 10:07
倪老师，您那边有没有一些组织标本研磨后做出来的流式散点图啊，不需要知道是用的什么抗体，就只需要看到 ...

我们做了很多，有淋巴结、睾丸、大网膜、肿瘤穿刺组织等，但是做的都是造血系统标记，因为都是为了排除淋巴瘤或白血病。