Treg分析

她说加油JJ · 发表于 2016-11-24 23:13:45

@niwanmao 老师，可以帮忙看一下图吗？是否应该这样

niwanmao · 发表于 2016-11-25 21:06:07

CD127或foxP3没有加吗？可以这么设门，但是CD127或者foxP3建议加上。

她说加油JJ · 发表于 2016-12-1 15:10:02

niwanmao 发表于 2016-11-25 21:06
CD127或foxP3没有加吗？可以这么设门，但是CD127或者foxP3建议加上。

老师，FL2-H通道是FOXP3。谢谢老师，您再帮我看看

niwanmao · 发表于 2016-12-1 15:32:42

她说加油JJ 发表于 2016-12-1 15:10
老师，FL2-H通道是FOXP3。谢谢老师，您再帮我看看

感觉破膜效果不是很好。

她说加油JJ · 发表于 2016-12-2 10:06:39

niwanmao 发表于 2016-12-1 15:32
感觉破膜效果不是很好。

用的是 FOXP3 Fixation Permeabilization ，按照说明书操作的，老师可以指导问题在哪儿吗？这结果可以用吗？

niwanmao · 发表于 2016-12-2 20:32:26

她说加油JJ 发表于 2016-12-2 10:06
用的是 FOXP3 Fixation Permeabilization ，按照说明书操作的，老师可以指导问题在哪儿吗？这结果可以用 ...

问题在哪儿我也说不好，如果实验步骤没问题，破膜剂、抗体均有可能，只能一一排除。结果我是觉得不太好，但最好结合一下你们的课题设计。

yangguo1018 · 发表于 2016-12-6 16:20:41

感觉CD25应该换成BV421的标签，这样不至于APC太大难以进入胞内。

niwanmao · 发表于 2016-12-6 19:25:45

yangguo1018 发表于 2016-12-6 16:20
感觉CD25应该换成BV421的标签，这样不至于APC太大难以进入胞内。

如果破膜的孔这么小的话，就更加说明破膜效果差了。不过，CD25是胞膜的，不是胞内的。

yangguo1018 · 发表于 2016-12-8 09:59:31

niwanmao 发表于 2016-12-6 19:25
如果破膜的孔这么小的话，就更加说明破膜效果差了。不过，CD25是胞膜的，不是胞内的。 ...

有道理！我一直用的BD破膜试剂，效果挺好。

她说加油JJ · 发表于 2016-12-8 22:15:21

niwanmao 发表于 2016-12-6 19:25
如果破膜的孔这么小的话，就更加说明破膜效果差了。不过，CD25是胞膜的，不是胞内的。 ...

不懂。。。我们实验室机器是比较老的BD 流式细胞仪，只有FITC APC PE PerCP四个通道，那就是说CD25染的也不是很好，FOXP3也不好吗？谢谢啦，倪老师。至今TH17还也都做得不好

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