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[流式分选] 单标样品划线问题

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发表于 2016-12-7 17:53:54 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏5流星未解决


求助各位:
                对照组的划线位置怎么选择,百分比应该控制在多少之内;

                我这个划线得到的数据科学吗?

                 做的是CD11b阳性的髓系细胞


谢谢谢谢

同型对照,划到了将近10%

同型对照,划到了将近10%

阳性组,阳性率20%以上

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发表于 2016-12-7 21:21:58 | 显示全部楼层
你的样本是什么?为什么看不到CD11b阳性的细胞?
CD11b分群很好的。
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 楼主| 发表于 2016-12-7 22:54:52 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-12-7 21:21
你的样本是什么?为什么看不到CD11b阳性的细胞?
CD11b分群很好的。

样本是肝转移瘤组织制成的单细胞悬液;线上的不是阳性的细胞吗
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发表于 2016-12-8 08:14:10 | 显示全部楼层
PECO2016 发表于 2016-12-7 22:54
样本是肝转移瘤组织制成的单细胞悬液;线上的不是阳性的细胞吗

线上这些是非特异性荧光引起的荧光轻微增强,并非真正阳性。
同型对照不是设门的理想参照,站内以前发过很多帖说明过。

由于你用的是肝转移瘤组织细胞,所以大部分都是CD11b阴性的,此时就可以用这些细胞做对照设门,如果有髓系细胞,CD11b与阴性细胞是分得很开的,一眼就看出分界。
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 楼主| 发表于 2016-12-8 15:32:24 | 显示全部楼层
血标本中的这个阳性,也不是阳性细胞吗?

同型对照

同型对照

阳性组

阳性组
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发表于 2016-12-8 21:07:58 | 显示全部楼层
PECO2016 发表于 2016-12-8 15:32
血标本中的这个阳性,也不是阳性细胞吗?

如果血液中粒细胞测出来也是如此,那么就肯定有问题了。
1、首先排除掉Fc阻断问题,用AB型血清或BSA阻断试试看,染色有没有改善。
2、如果还是没改善,那么就是抗体有问题了。
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