不同破红液处理后的流式图，怎么差别这么大？

飞鸿317

最近开始做流式，C6的流式仪，人外周全血，抗体孵育后，加破红液室温裂解15min，然后洗然后上机。用了两种破红液，右边是solarbio的、左边是BD的。为什么细胞形态差别这么大？是不是BD的那个破红的时间有点久导致的？另外如何把握破红的时间？BD的破红液的原理是什么？望大神们解答。

niwanmao

BD的是加了固定剂的，所以会对FSC有影响，而Solarbio的配方应该就是氯化铵裂解液（站内可搜索到配方），所以分群比较自然。

飞鸿317

niwanmao 发表于 2016-12-8 21:08
BD的是加了固定剂的，所以会对FSC有影响，而Solarbio的配方应该就是氯化铵裂解液（站内可搜索到配方），所 ...

那哪种裂解液比较好呢？

niwanmao

飞鸿317 发表于 2016-12-9 00:02
那哪种裂解液比较好呢？

得看你的标记是否受固定影响，我们临床上都是自己配制氯化铵裂解液，不太喜欢用含固定成份的商品化裂解液。

飞鸿317

niwanmao 发表于 2016-12-9 08:11
得看你的标记是否受固定影响，我们临床上都是自己配制氯化铵裂解液，不太喜欢用含固定成份的商品化裂解液 ...

好的 谢谢

chymanhz

还和你的机型使用的遮光棒形状，收光系统设计有关系。

飞鸿317

chymanhz 发表于 2016-12-9 17:27
还和你的机型使用的遮光棒形状，收光系统设计有关系。

这可是一个机子做出来的啊

小憨

chymanhz 发表于 2016-12-9 17:27
还和你的机型使用的遮光棒形状，收光系统设计有关系。

怎么说？想学习一下~

chymanhz

飞鸿317 发表于 2016-12-10 14:15
这可是一个机子做出来的啊

哈哈，这话是针对裂解液和流式图来说的，不是针对你这个特例啦

chymanhz

小憨 发表于 2016-12-11 23:38
怎么说？想学习一下~

不同裂解液配方的折射率会不一样，裂解后细胞的形态也会不一样，出来的散射光角度也会有差异，目前比较常见的遮光棒就是C6，BD代表的一根直条的那种，贝克曼的那种十字形状的（不包括赛景），还有就是锥形的（ACEA的）等等，都是有针对性的优化的，当然鞘液不同也有一定影响，但是没有裂解液对细胞影响的大。