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〖你问我答〗为什么我这台仪器的CV值大?

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发表于 2017-1-12 19:17:31 | 显示全部楼层 |阅读模式

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先来看两幅图。

fig1.png
图1

fig2.png
图2

上面这两幅图,你看出什么区别了没?
比较明显,图1的波峰基底明显宽于图2,也就是说,图1的CV值明显大于图2,这意味着什么?如何纠正?



CV值偏大,超出正常范围,往往意味着仪器失控,原因可能是:
  • 喷嘴被细胞团块部分堵塞
  • 光路轻微偏离,就是说激光与流动室交叉点轻微偏离了正确的位置


解决方法如下:
如有条件,建议用超声波清除喷嘴的堵塞,然后再跑一下校准微球,用专用工具调节喷嘴和激光位置,校准机器。

正常情况下,激光应该与液流相交,并且相交点应该特定位置,同时校准微球跑出来的图形应该是如图2那样又细又亮。
实例

在现实工作或实验中,如何及时发现喷嘴堵塞或光路偏呢?
1、定期跑一下校准微球,这个钱还是得花的。
2、注意图形变化,这里举个实例:
fig3.png
我们前段时间的Navios流式细胞仪跑出的图形,明显看到CD45存在很长的拖尾,后来跑了下FlowCheck Pro,发现部分通道荧光偏弱并且CV值偏大
fig4.png
请工程师用专用工具清除喷嘴堵塞并校准光路后,CD45/SSC散点图就恢复正常了,不再出现CD45拖尾了。

所以,很多时候,实验结果好不好或者漂亮不漂亮、可靠不可靠,除了实验方案和步骤,还跟仪器的状况关系很大。BD的仪器可以定期1~2周跑一次CST微球,Beckman定期跑一下FlowCheck,艾森或其它小仪器可以定期跑一下Rainbow微球,相当于对机器做定期体检,保证大家的实验结果。
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