如何确定目的细胞群

特勒兮兮

上图是本人测的一管细胞跑流式的图片，有点不能确定目的细胞群是哪一群，因为两群第一通道的阳性率好像也差不多。
如果P2不是目的细胞群的话，那么这是什么东西为什么阳性率那么高，是怎么造成的，求大神解答啊.......

家的感觉

个人认为P1是状态好的细胞，P2是状态不好或者说是坏死细胞，做凋亡是会经常遇到这样的细胞群

niwanmao

不知道你FL1是什么抗体？另外，不知道你的细胞是大的还是小的

特勒兮兮

niwanmao 发表于 2017-3-17 20:19
不知道你FL1是什么抗体？另外，不知道你的细胞是大的还是小的

首先不管孵育的是什么抗体，细胞是大的还是小的，跑流式任何一群我培养出来的细胞，不管是淋巴细胞还是干细胞，都会有这么两群，我们通常是圈的P1这一群，但是有时候P2这一群占的比例太大，想知道这一群是怎么出现的，怎样能尽量减少这一群

niwanmao

特勒兮兮 发表于 2017-3-20 09:18
首先不管孵育的是什么抗体，细胞是大的还是小的，跑流式任何一群我培养出来的细胞，不管是淋巴细胞还是干 ...

如果每个标本都是如此，并且可以排除样本制备问题的话，那么就需要怀疑液路问题。

此外，还有一个可能性，不能排除P2是正常的，而P1是粘连体细胞的可能

特勒兮兮

niwanmao 发表于 2017-3-20 09:52
如果每个标本都是如此，并且可以排除样本制备问题的话，那么就需要怀疑液路问题。

此外，还有一个可能性 ...

第一：老师如何看楼上说的P2只是状态不好的细胞，因为我们通常是把P2当做是状态不好的细胞，但是没有确切的理论依据、、
第二：老师，如果P1 是粘连题的话，怎么证明他是粘连体，或者是怎么排除它呢

niwanmao

特勒兮兮 发表于 2017-3-20 10:46
第一：老师如何看楼上说的P2只是状态不好的细胞，因为我们通常是把P2当做是状态不好的细胞，但是没有确切 ...

C6是低端仪器，所以在很多功能上不完善，所以你这里的第2个问题无法在C6上实现。
第1个问题好办，你染个低浓度PI 1分钟上机就知道了。你将他当成状态不好的细胞也是没有绝对的依据的，尽管他的FSC是小，但有些细胞就是小的。

第2个问题在C6无法实现，其它仪器是可以通过FSC-H/FSC-W或SSC-H/SSC-W等参数排除粘连体。