为什么双染设门后细胞是连成线状的？电压还是补偿？

喵喵的兔子

最近做了好多次凋亡双染了，每次都不会很好的调电压。请问倪老师各位大神，最新的flowjo是不是有可以重新改变细胞分布即相当于调电压的功能？还有就是染完色上机时到底要怎么调电压啊？怎么是个标准或者判断呢？
上面那张图可以看出很多细胞是线状的不知道是为什么？并且有warning的提示。
下面那张图我标出了压在坐标轴上的细胞，怎么才能让它正常出现在象限内呢？是不是没有调好补偿？

喵喵的兔子

附一张补偿的图

喵喵的兔子

对了，我用的细胞是Hela，就是做抗肿瘤活性的，双染用的是FITC和PI

niwanmao

在坐标显示那里选择Biexp显示模式。

喵喵的兔子

niwanmao 发表于 2017-3-17 20:26
在坐标显示那里选择Biexp显示模式。

老师，是更改第一张散点图的坐标显示模式么？可是只有线性和对数两种模式啊？

niwanmao

喵喵的兔子 发表于 2017-3-18 09:51
老师，是更改第一张散点图的坐标显示模式么？可是只有线性和对数两种模式啊？ ...

不会，你点那个T 按钮，看设置

喵喵的兔子

niwanmao 发表于 2017-3-18 10:22
不会，你点那个T 按钮，看设置

老师我改了坐标显示，还调大了extra negative和width basis，为什么细胞还是线状的呢？

niwanmao

喵喵的兔子 发表于 2017-3-18 10:50
老师我改了坐标显示，还调大了extra negative和width basis，为什么细胞还是线状的呢？ ...

那就是数据兼容性问题了，没办法

喵喵的兔子

niwanmao 发表于 2017-3-18 11:04
那就是数据兼容性问题了，没办法

意思是电压太大了吗？那做的怎么调电压呢？标准和判断是什么呀？

niwanmao

喵喵的兔子 发表于 2017-3-18 11:23
意思是电压太大了吗？那做的怎么调电压呢？标准和判断是什么呀？

数据兼容性，不是电压。就是说你这个流式细胞仪产生的数据在Flowjo上分析不太适合。建议还是用机器自带的软件分析。