流式分析染色体核型的『圆』与『缺』

niwanmao

常规核型分析可对分裂中期的细胞涂片进行遗传学分析，但流式细胞术也可用于染色体悬液检测核型。
染色体制备质量要保证良好，需要采用指数生长期的细胞。通过加入谷氨酸阻断有丝分裂。在适当的时间（4小时 ～ 过夜）之后，使用去污剂溶液破坏细胞膜，并回收游离的染色体，然后染色体制备物用两种DNA染料染色：
Chromomycin A3，标记富含CG的DNA区域；
Hoechst 33258，标记富含AT的区域。

然后染色体根据其DNA含量（大小）和碱基对组成分离开来。
下面的散点图显示了染色体1-8、X、Y和13-22的清晰分离，只有9-12由于在尺寸和碱基对组成上类似而无法分离。



如果存在足够的差异，可以检测到正常分布的畸变。例如，21号染色体上的21三体，可检测出染色体21峰荧光强度出现50％增加；或者在易位的情况下，染色体大小和碱基对组成的改变有时候能够充分识别出衍生染色体。下图就是（11;22）平衡易位的一个例子，其中可以清楚地识别两种衍生染色体。



由于在正常人群中发生的多态性，流式核型分析技术的临床应用受到限制。流式核型研究的真正优势是利用现代流式细胞仪的分选能力，分选出明显的易位和重排染色体，用于人类遗传学研究、制备基因组文库。
当然，如果未来能够充分解决染色体区分和临床应用稳定性问题，临床广泛使用也是可期待的。