GFP荧光整体偏移

ghqiu09

是这样，转染带GFP荧光的质粒，流式检测后细胞没有明显的分群，但是只有整体的偏移，大概在40%左右。如果是染料的话，还可以滴定啊别的什么，可是这是GFP，这又该怎么判定门设的对不对呢？

niwanmao

GFP很简单，就是看分群，如果没有分群，那么就说明是没染上。

ghqiu09

niwanmao 发表于 2017-5-26 18:11
GFP很简单，就是看分群，如果没有分群，那么就说明是没染上。

那我这么圈门是不对的？应该圈冒头的那些？

maomao

ghqiu09 发表于 2017-5-27 09:01
那我这么圈门是不对的？应该圈冒头的那些？

这种设门是不对的，冒头的才对

a86856635

应该是表达量低，还没有明显的分群。不要用FSC和荧光通道画门，用1通道和2或3通道画门分群应该会明显一些

ghqiu09

maomao 发表于 2017-5-27 10:14
这种设门是不对的，冒头的才对

冒头的那部分才百分之五六左右，可我在镜下看觉得带有荧光的细胞应该是不止这么点的，虽然觉得40有点多，心想估计是有些荧光太弱了，被认为不是了，所以才这么画的

guchen2016

你的control是未转染组吧

静水流深

不知楼主后来找到问题的原因了吗？我也遇到同样的情况，求解。