细胞凋亡结果分析

被动的孤独主义

为什么我的阴性细胞、单染以及实验组的结果都是这个样呢？左上是阴性，左下是单染PI，右上是单染Annexin V，右下是实验组。请大神们不吝赐教，是电压还是补偿问题啊？感激不尽。

angke123

看FS和SS的图没用，你不是染了荧光素吗，看通道图

niwanmao

FSC和SSC散点图是看细胞大小和颗粒的，并不是看电压和补偿的。
至于不同样本之间的FSC差异，这是正常的，无需纠结。

一成天

荧光图呢？

被动的孤独主义

感谢各位大神的回复，我后来选了全部细胞，自己画了十字门，拜托大神扫一眼。我有三个问题想请教：1.请问我这样画十字门对不对？2.我选了全部的细胞进行分析，是否不妥？3.右上是单染Annexin V是不是补偿没有调好啊？依然是：左上是阴性，左下是单染PI，右上是单染Annexin V，右下是实验组。
问题很小白，如果能不吝赐教，将会对我带了很大的帮助。鞠躬！谢谢！

ghqiu09

被动的孤独主义 发表于 2017-9-7 10:35
感谢各位大神的回复，我后来选了全部细胞，自己画了十字门，拜托大神扫一眼。我有三个问题想请教：1.请问我 ...

补偿是没有太调好的感觉，然后想问问你AnnexinV抗体用量是多少，感觉偏多了。一般说明书上都标的都比较多，往往1-2ul就够了。

被动的孤独主义

ghqiu09 发表于 2017-9-7 10:49
补偿是没有太调好的感觉，然后想问问你AnnexinV抗体用量是多少，感觉偏多了。一般说明书上都标的都比较多 ...

你好，我是加了5ul的Annexin V-FITC和5ul的PI。请问我这样分析的思路和方法（十字门的设定）是否正确呢？

明天的晴天娃娃

1，圈门  我做的是jurkat细胞。在调节SSC和FSC的时候，发现有两群细胞，左下角那一群我认为是细胞碎片，所以选择了中心部分的细胞进行分析。图1
2，选择阳性诱导剂诱导一些细胞，然后进行单染。上机进行补偿调节。我们选择的是FL1（FITC）和FL2（PI）通道，使单染的每个通道的两团细胞中心点都与坐标轴平行。图2 （因为后来每次都不收集单染细胞，所以选择了一个之前保留的图片）
3，将样本进行上机。图3

明天的晴天娃娃

明天的晴天娃娃 发表于 2017-9-13 10:37
1，圈门  我做的是jurkat细胞。在调节SSC和FSC的时候，发现有两群细胞，左下角那一群我认为是细胞碎片，所 ...

这是我做实验的流程和图，不知道是否有帮助。

niwanmao

被动的孤独主义 发表于 2017-9-7 10:35
感谢各位大神的回复，我后来选了全部细胞，自己画了十字门，拜托大神扫一眼。我有三个问题想请教：1.请问我 ...

PI-Annexin V的补偿稍微调大一些，就好了。结果还挺好的啊。