多色补偿时，同型对照是只有一管还是多管

lgfffancy

有些自动补偿仪器，有个unstained管，那组就是上同型对照的吧，但是只有一管啊，那是不是多色的调补偿同型对照只需要一管即可？ 这一管里加所有同型抗体？ 没太明白呢，请教一下哈

774055480

unstained管就是blank管，什么也不染，只有样本细胞在，是用来调整电压的。同型对照管你可以加在一管里也可以分开的，像FMO就是直接一个同型。

zj8237277

如比，我需要做5个指示，如何设计实验呢？  
1号管： 细胞+5个流抗
那其他的管如同型对照管如何设计呢？  是细胞+5个ISO嘛？
除了同型对照管，还应该设计哪些组呢？
谢谢！

niwanmao

zj8237277 发表于 2017-7-18 19:22
如比，我需要做5个指示，如何设计实验呢？  
1号管： 细胞+5个流抗
那其他的管如同型对照管如何设计呢？   ...

你需要先说明你的实验目的是什么？方案包括了哪些抗体。
同型对照一般是不建议用的，建议用BSA阻断＋FMO对照或生物学阴性对照

zj8237277

倪老师，您好！
我只是想单纯的知道一下同型对照如何设置的？还请指教：如上面提到的假如5个指标的实验。 谢谢！

niwanmao

zj8237277 发表于 2017-7-19 18:38
倪老师，您好！
我只是想单纯的知道一下同型对照如何设置的？还请指教：如上面提到的假如5个指标的实验。  ...

前面已经说的很清楚了，你的实验不需要同型对照，而且同型对照已经过时了，是个错误的设置。

参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5895-1-1.html

zj8237277

好的，谢谢！

我想成大牛

你是做仪器上自带的补偿设置吧。需要unstaining和单阳管。你为你的5个指标搭配5种合适的荧光，那么你需要准备1管unstainning+5管对应荧光的单阳管。按照机器指示分别上机，最后仪器自动计算5个通道间的补偿。同型对照的概念根本不是你理解的那样。

小坚强17

同型对照是去除非特异性结合的，补偿需要单染，1个blank+5个单染