荧光通道选择

sixiaohai

各位大神，流式小白请教个问题，关于在BD上的FL1、FL2、FL3和FL4通道是啥意思？因为在我们的机子上没有见到，是不是有相对应的选项呢？如果用FDA和PI染色细胞，应该选择哪个通道啊？

fushuai5130

FL1 是fitc FL2 是PE  FL3 是PerCP  FL4 是APC

niwanmao

FDA这个染料没见过，你看一下是什么通道激发，发射光是多少nm，然后选择相应的通道，每个通道的激发光和发射光，机器附带的说明书上都有的。

didi_zhou

最好说一下是什么仪器，每个仪器会不同。如果只有4个通道那应该就是Calibur或C6。FDA可以使用FITC通道来检测，一般是FL1。PI用FL2。

我想成大牛

去流式仪上查看cytomer，里面一般会有该仪器配置的检测器的简图（三角盘或八角盘）。常说的FL1-FL4指的是4个检测器，分别检测不同波段的荧光信号。我们常说FL1是FITC，其实是说该检测器可以检测代表FITC信号的那段波长，488的检测波段与FITC是一样的，所以FL1通道也可以检测488，所以FITC与488是不能同时使用的。其他的也是同样的道理。这里面忽视了不同的激发光，现在高端的流式仪已经不这么说了，只说有几通道多少色（比如ＢＤfortessa:4通道18色，指4个激发光管,red,bule,green,violet,可以同时检测18种荧光——即4个检测通路，搭配18个不同的检测器）

muyang

niwanmao 发表于 2017-7-26 19:46
FDA这个染料没见过，你看一下是什么通道激发，发射光是多少nm，然后选择相应的通道，每个通道的激发光和发 ...

倪老师，您好，您这里有不同燃料对应的激发光和发射光波长，及哪些燃料之间互相需要调补偿的图吗分享下，谢谢

ztz99a

muyang 发表于 2019-7-23 11:10
倪老师，您好，您这里有不同燃料对应的激发光和发射光波长，及哪些燃料之间互相需要调补偿的图吗分享下， ...

坛子里好像有，有的试剂商也有，这边有张激发光的，我顺手拍一下，应该不算广告吧-0-（其实我就想赚点积分看帖子。。。。

niwanmao

muyang 发表于 2019-7-23 11:10
倪老师，您好，您这里有不同燃料对应的激发光和发射光波长，及哪些燃料之间互相需要调补偿的图吗分享下， ...

我们首页上有《目前最全的荧光素/荧光蛋白激发、发射波长数据库》，但是补偿没有。可通过波长大致推测。

小白来也

通道 还是看配置吧  我理解是以前机器通道少  大家FL1 FL2按顺序排 现在机器通道多了  再这么说容易有差错  做好看仪器配置

FDA搜到一个这个  参考  通道和FITC差不多

muyang

ztz99a 发表于 2019-7-23 17:13
坛子里好像有，有的试剂商也有，这边有张激发光的，我顺手拍一下，应该不算广告吧-0-（其实我就想赚点积分 ...

好的，谢谢