求教小鼠脾脏淋巴细胞增殖和活化的检测

yxyyjs

流式小白，求助

我想用流式细胞术检测正常组、模型组和治疗组小鼠的脾脏中T细胞增殖（CFSE法）及活化（流检测T淋巴细胞CD25、HLA-DR以及CD69的表达）还有Th1/Th2和Treg/Th17细胞亚群的比例，想问一下，是一定要各组小鼠脾脏的新鲜淋巴细胞收集后都要进行相应体外培养刺激后才能孵育抗体进行检测，否则增殖、活化、TH1、TH2和TH1测不出来的？

测增殖时，射门分析CD3阳性的细胞去分析CFSE，是否可以说明T淋巴细胞的增殖情况？

还要就是Treg直接用ebio的试剂盒，可以取脾脏获取淋巴细胞后可以立即孵育抗体进行检测吧？

完全不会这块内容，硬着头皮上，好痛苦

niwanmao

1、这几个亚群的分群和活化都可以直接检测，但是增殖是需要CFSE合适的浓度和时间作用后进行培养。
2、设门CD3＋T分析其增殖当然最好。
3、Treg可以直接测。

ghqiu09

Treg可以得到细胞后，直接检测

yxyyjs

ghqiu09 发表于 2017-8-7 17:55
Treg可以得到细胞后，直接检测

谢谢

yxyyjs

niwanmao 发表于 2017-8-8 12:50
1、这几个亚群的分群和活化都可以直接检测，但是增殖是需要CFSE合适的浓度和时间作用后进行培养。
2、设门C ...

谢谢倪老师的耐心解答。之前听过您的讲座，受益匪浅。
现在我只会测测凋亡、周期、ROS这些简单的检测，从涉及到过淋巴细胞的这些检测。
后边会先做预实验自己摸索一下条件。

niwanmao

yxyyjs 发表于 2017-8-9 16:41
谢谢倪老师的耐心解答。之前听过您的讲座，受益匪浅。
现在我只会测测凋亡、周期、ROS这些简单的检测，从 ...

欢迎经常上来交流，有些细节大家一起讨论可能会更明确。