TLR7在B细胞上的表达

fitlao

测TLR7在B细胞上的表达，表面染CD19-APC圈定B细胞，破膜后PE染TLR7、ISO。做了几个样本，都是TLR7与ISO的MFI没差别。请各位高手指点一下，谢谢！

steven

虽然不知道到底是什么原因，但你这两张图左侧都有很大一部分没有显示全，如果在选择出B细胞的基础上，同型对照还出现两个峰的话，是不是要考虑一下同型对照的正确性。
你也可以把具体操作流程说一下。

niwanmao

同型对照很难选择正确，这个可以搜一下“同型对照”关键词，看看以前我发的帖子。

建议用Fc Blocking阻断后再标记

fitlao

niwanmao 发表于 2017-8-17 20:19
同型对照很难选择正确，这个可以搜一下“同型对照”关键词，看看以前我发的帖子。

建议用Fc Blocking阻断 ...

确实没有使用Fc Blocking，之前做Sirt1表达时与ISO有明显差异。下周用Fc blocking阻断后再看看。因此还有个问题，使用同型对照也是要用Fc Blocking吗？二者不能替代吗？

fitlao

fitlao 发表于 2017-8-17 23:55
确实没有使用Fc Blocking，之前做Sirt1表达时与ISO有明显差异。下周用Fc blocking阻断后再看看。因此还有 ...

我找到答案了
看了@niwanmao 老师之前几个的帖子
“生物学阴性对照最佳，其次是FMO＋Fc Blocking。同型对照在多色实验中，用了Fc Blocking之后就几乎没什么意义了。”
可以理解为做了Fc blocking，就不需要再用同型对照，是这个意思吧？

niwanmao

fitlao 发表于 2017-8-18 08:25
我找到答案了
看了@niwanmao 老师之前几个的帖子
“生物学阴性对照最佳，其次是FMO＋Fc Blocking。同型对 ...

是的。