请教一下，这幅图各个参数 选项各代表什么

lgfffancy

做流式不太会看这张图，请高手教教，说说各项含义，以及如何正确使用这个常用网站。
这个网站最主要是看补偿的吧~

我想成大牛

老铁，很简单。以APC为例。fluorochrome指荧光颜色。EX是它的激发光谱，在它的最高点的那个黄色的框是指最佳激发波长。EM是发射光波谱，最高点的那个框是指检测波段。Filters是指滤光片，660/20是带同滤片（banpass,650nm-670nm,即660±10）。最后的框子里面或许是建议你他们间的互相补偿值吧。
这个工具的作用就是直观的告诉你，两个荧光在某个流式仪的检测滤片条件下，他们是否有补偿以及补偿的程度如何。当然，工具虽好，一切还是要看实际情况的。

lgfffancy

我想成大牛 发表于 2017-8-18 17:25
老铁，很简单。以APC为例。fluorochrome指荧光颜色。EX是它的激发光谱，在它的最高点的那个黄色的框是指最 ...

想再请教一下，这里的两种荧光素APC和Texas Red，他们的最佳激发光发别是多少图上有显示吗？还有我看APC有630/22和660/20这是指，可分别有这两组滤光片来收集APC的荧光信号吗？but 我看最好的吸收峰顶在660那里呢。请解释一下谢谢

我想成大牛

lgfffancy 发表于 2017-8-21 15:37
想再请教一下，这里的两种荧光素APC和Texas Red，他们的最佳激发光发别是多少图上有显示吗？还有我看APC ...

一般激发光是虚线表示，最高峰就是最佳激发波长，但是，一个流式仪配置的激光器不可能发出所有荧光的最佳激发光，所以，很多时候荧光的激发光都是在最高峰附近，不一定是最高峰。
至于APC的检测波段是根据你使用的流式仪配置的滤光片决定的，数值并不是随便确定的。
在这两种滤光片中，肯定是660/20更好，因为它的检测范围（即曲线下面积）包含了APC信号最多的部分。630/22可能是检测其他荧光的滤片。
具体的你可以查看流式仪软件里面的cytomer信息，一般都会提供仪器中配置的检测通路及滤光片组合。

lgfffancy

我想成大牛 发表于 2017-8-22 14:58
一般激发光是虚线表示，最高峰就是最佳激发波长，但是，一个流式仪配置的激光器不可能发出所有荧光的最佳 ...

恩恩，最后再问一句哈，这个图上我只看到一个激发光640nm，它荧光时APC的激发光，那Texas-Red的激发光好像看不到，在哪里看啊

我想成大牛

https://www.biolegend.com/spectraanalyzer 你可以用biolegend的工具。
Texas-Red和PE的激发光差不多，要么是488绿色激光器激发，要么是561黄绿色激发器激发。你可以调最上面那个640旁边的下拉菜单，换成488.