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标题：foxp3破膜时间 我现在正在做foxp3破膜后的流式检测，用的都是ebioscience公司的破膜剂和抗体，破膜时间我刚开始用了50分钟（4度避光），流式检测发现都是细胞碎片，后来减短为30分钟，三管中除了一管没有细胞碎片外其余两管仍有很多碎片，很纳闷，如果再缩短破膜时间的话，我担心foxp3抗体又进不了 胞内，请各位老师指教!
回复ni老师：
我所用的细胞是从外周血分离获得的淋巴细胞并加用各种细胞因子培养了十天，显微镜下细胞状态还是不错的，破膜剂是半年前从联科公司购买的。图片如下：
回答者：niwanmao 按照ebioscience的protocol，的确是需要30－60分钟破膜。如果出现你所说的情况，需要考虑以下几种可能：
1、标本问题。标本是否新鲜？
2、试剂问题。破膜剂有没有问题？
3、获取。由于使用破膜剂后，细胞大小等性质会发生改变，有没有可能跟你所谓的碎片混在一起了？最好放几张图上来看看。 2009年8月12日 0:54 | 
发表于 2010-8-1 21:15:23
发表于 2013-1-5 23:21:16
