经过不同的处理细胞大小和颗粒度会改变吗，设的门能变吗

张晓丽

wlting

我做细胞体外刺激，四天后再上流式，发现细胞大小和颗粒度都改变了，而且全阴样品的自发荧光也变强了，不知道是怎么回事。对比0天所做的，真的是很大变化。如果要把0天和第四天的对比，就要把阳性门的位置拉动，这样0天的阳性率也跌的很厉害，几乎都要变成0了，很纠结~~~同问这个问题~~

niwanmao

wlting 发表于 2017-8-26 18:22
我做细胞体外刺激，四天后再上流式，发现细胞大小和颗粒度都改变了，而且全阴样品的自发荧光也变强了，不知 ...

经过刺激，细胞内的代谢物和颗粒度都会发生变化，所以自发荧光水平肯定不同，所以不同的时间点要设置对应的生物学阴性对照。

niwanmao

设门可以变，但需要以生物学阴性对照为标准。

张晓丽

niwanmao 发表于 2017-8-26 22:08
设门可以变，但需要以生物学阴性对照为标准。

老师学生愚钝，生物学阴性对照是指未染的细胞吗

张晓丽

张晓丽 发表于 2017-8-26 23:32
老师学生愚钝，生物学阴性对照是指未染的细胞吗

麻烦老师帮我看看我的细胞状态，还有我在获取样本的时候的分裂峰正常吗

niwanmao

张晓丽 发表于 2017-8-26 23:32
老师学生愚钝，生物学阴性对照是指未染的细胞吗

生物学阴性对照＝不表达目的抗原的细胞，经过同样的染色步骤处理

张晓丽

niwanmao 发表于 2017-8-27 08:37
生物学阴性对照＝不表达目的抗原的细胞，经过同样的染色步骤处理

老师我是用CFSE染色，看增值的，那生物学阴性对照是没有刺激的吧？

张晓丽

张晓丽 发表于 2017-8-27 10:49
老师我是用CFSE染色，看增值的，那生物学阴性对照是没有刺激的吧？

老师我的细胞状态怎么样

wlting

niwanmao 发表于 2017-8-26 22:07
经过刺激，细胞内的代谢物和颗粒度都会发生变化，所以自发荧光水平肯定不同，所以不同的时间点要设置对应 ...

老师，生物学阴性对照可以是相同时间点的细胞，不加一抗，只加荧光二抗的对照吗？我是有做这样的对照的，但是发现用0天时候圈好的门和设好的阳性阴性门，4天时候的空白对照有10%左右的阳性率，这样我要把阳性阴性的门重设吗？那对应的0天的我也要设的和它一样吗？