流式细胞术也能测FFPE样本的DNA倍体

niwanmao

Barrett食管是指食管下段的鳞状上皮被柱状上皮覆盖，因为英国人Barrett首先报道，因此称Barrett食管，中文翻译为巴雷特食管。目前认为是获得性，可能与反流性食管炎相关，并有发生腺癌的可能。其症状主要是胃食管反流及并发症所引起的，胃食管反流症状为胸骨后烧灼感、胸痛及反胃。

现在，不需要患者新鲜组织，使用福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）样本，就能通过流式细胞术进行DNA含量检测，以帮助增生异常的诊断和风险分层。

在7月25日在线刊登于Gut的研究中，Dr. Won-Tak Choi及其同事利用DNA流式检测了一批FFPE样品：80例HGD、38例LGD、21例IND、14例不存在增生异常。

在95.0％的HGD（高度增生异常）样品、21.1％的LGD（低度增生异常）样品、9.5％的IND（增生异常不明确）样品中均检测出DNA倍体异常，而无增生异常的样本中，DNA倍体均为正常二倍体。对于HGD，灵敏度为95％，相应的特异度为85％。


例1、无增生异常患者的DNA倍体为正常二倍体，不存在异倍体。



例2、HGD（高度增生异常）患者，上面一行存在两个异倍体（蓝色和红色）、下面一行虽然没有异倍体，但G2/4N区比例>6％，故判断为异常。

研究人员指出，DNA倍体异常的存在与增生异常水平的增加相关。在LGD或IND患者中，通过单因素分析，如果存在DNA倍体异常，那么后续进展到HGD/食管腺癌的风险比分别为7.0和20.0。

一旦诊断Barrett食管高度增生异常（HGD），通常需要切除或内镜消融治疗，DNA流式细胞术可以选择性地应用在不明确的HGD病例（基于组织学诊断困难的HGD病例），以确认HGD的形态学异常的真实性，还可以用在积极治疗前胃肠道病理学家之间意见不一致的情况下。

此外，DNA流式细胞术在LGD和IND样本中的应用，可以早期发现这些病例进展到HGD或食管腺癌的风险，从而可进行更频繁的内窥镜监测或消融治疗。

研究人员指出，除了相对简单和便宜之外，使用FFPE组织进行DNA流式细胞分析可以选取那些存在形态异常的区域，可提高阳性率，另外，也避免了流式细胞术和组织学以往需要分开单独活检的烦琐，简化了处理过程。

下面看具体的步骤。

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参考文献：

Choi W, Tsai J, Rabinovitch PS, et al Diagnosis and risk stratification of Barrett’s dysplasia by flow cytometric DNA analysis of paraffin-embedded tissue Gut Published Online First: 22 June 2017.