JC-1检测线粒体膜电位

迷路的甘甘 · 发表于 2017-9-4 17:31:54

本帖最后由迷路的甘甘于 2017-9-4 17:32 编辑

最近做用JC-1检测线粒体膜电位，出现了与凋亡结果相反的趋势，即凋亡比例高的组，线粒体膜电位也变高，做了好几次重复试验了，都是这样，但是这不科学啊，跪求大神帮助

迷路的甘甘 · 发表于 2017-9-4 17:35:43

上面是我的图，NC是未染色的阴性对照，PC是加CCCp诱导的阳性对照，0-是未处理的正常对照组，其他处理强度3、7、13依次增加，凋亡比例是增高的，但是膜电位却越来越高，实再不知道怎么了，在线求解

niwanmao · 发表于 2017-9-4 17:53:43

迷路的甘甘发表于 2017-9-4 17:35
上面是我的图，NC是未染色的阴性对照，PC是加CCCp诱导的阳性对照，0-是未处理的正常对照组，其他处理强度3 ...

对应的FSC/SSC散点图如何？

ps654321 · 发表于 2017-9-4 21:08:33

迷路的甘甘发表于 2017-9-4 17:35
上面是我的图，NC是未染色的阴性对照，PC是加CCCp诱导的阳性对照，0-是未处理的正常对照组，其他处理强度3 ...

你有没有发现你阳性对照跟 0 组比，没有区别？那阳性对照没有发挥任何作用，你后面结果有问题也不意外。
另外我个人对你圈门持保留意见。JC-1正常是RED，结合后是GREEN，你想想如何解释你自己的圈门？那如果按照你的圈门，那就只能看Q3，那阳性组的Q3跟0组的Q3无任何区别。。。。。

迷路的甘甘 · 发表于 2017-9-5 13:12:59

这两个是PC和NC的散点图

迷路的甘甘 · 发表于 2017-9-5 13:15:22

niwanmao 发表于 2017-9-4 17:53
对应的FSC/SSC散点图如何？

老师，这是散点图，分别是0-，PC和NC

迷路的甘甘 · 发表于 2017-9-5 13:20:30

ps654321 发表于 2017-9-4 21:08
你有没有发现你阳性对照跟 0 组比，没有区别？那阳性对照没有发挥任何作用，你后面结果有问题也不意外。
...

您好，我十字门是根据不染色的NC把这群不发光的细胞放到左下角，让后PC确实阳性对照可能没有诱导成功，但是也看得到有上下俩群，就算不画十字门，我的样本细胞也是逐渐由Q4向Q3，膜电位变高了，但是跟我的预期正好相反

迷路的甘甘 · 发表于 2017-9-5 13:21:52

niwanmao 发表于 2017-9-4 17:53
对应的FSC/SSC散点图如何？

好像0-没有传上来，就补上，请老师看看

niwanmao · 发表于 2017-9-5 20:40:12

迷路的甘甘发表于 2017-9-5 13:21
好像0-没有传上来，就补上，请老师看看

这个CytoFlex貌似可以放大图形的，你把FSC/SSC散点图坐标还能再放大吗？感觉FSC的A和W排除粘连体的图形不对啊。

迷路的甘甘 · 发表于 2017-9-5 21:50:37

niwanmao 发表于 2017-9-5 20:40
这个CytoFlex貌似可以放大图形的，你把FSC/SSC散点图坐标还能再放大吗？感觉FSC的A和W排除粘连体的图形不 ...

老师，我把原数据发上来，请您帮忙分析一下，我本来想着试试能不能分成左右俩群，因为看着好像左右也有分叉，但是我自己调不出来，感谢您

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