请帮忙分析一下这两个通道能否同时染呢？

lgfffancy

488nm 激光的 675/30 和640nm 激光的 675/30,这两个通道可以同时染吗？
我感觉好像不可以因为，收集的都是相同吸收峰范围的光呀，如果能染，那需要调补偿吗？
另外：还有大家知道哪些通道不能同时染吗，对应的是什么荧光素，谢谢~

niwanmao

可以同时染。
488nm激发，670附近是PE-cy5或PerCP系列。
640nm激发，660附近是APC和AF647系列。

因为他们的光路不在一起，所以最后分解出来的光是通过不同滤光片检测的，可以同时检测。

ghqiu09

可以吧，之前记得不同激发光的光路是不在一条路上的，但是不理解为什么又需要补偿。不能同时染的染料多了，哪里记得过来

Shura

看波长用的可能是APC和PE-Cy5 这两个通道理论上是可以同时用的 但是补偿有些大
不同通道间一般都可以搭配荧光素共染 需要根据实际情况进行选择

lgfffancy

niwanmao 发表于 2017-9-12 08:58
可以同时染。
488nm激发，670附近是PE-cy5或PerCP系列。
640nm激发，660附近是APC和AF647系列。

哦，我懂了，因为不同激发光的能量是不一样的，激发荧光分子的发射波长不同所以经过的光路不一样。但是像老师说的，PE-cy5和APC是不是有补偿呀？

lgfffancy

niwanmao 发表于 2017-9-12 08:58
可以同时染。
488nm激发，670附近是PE-cy5或PerCP系列。
640nm激发，660附近是APC和AF647系列。

我想再咨询一下各位老师，我这里有一个仪器的配置 ：
488nm（530/30   572/28   615/20   675/30   780/60）
640nm(675/30   780/60),
在这个七个通道中，有哪两个通道不能同时分析呢？

lgfffancy

niwanmao 发表于 2017-9-12 08:58
可以同时染。
488nm激发，670附近是PE-cy5或PerCP系列。
640nm激发，660附近是APC和AF647系列。

不好意思，老师我还想问一下如果某一荧光素分子都能被488和640nm的激光激发，那么他们的光路是不是相同的？

niwanmao

lgfffancy 发表于 2017-9-12 22:02
我想再咨询一下各位老师，我这里有一个仪器的配置 ：
488nm（530/30   572/28   615/20   675/30   780/6 ...

设置了7个通道，肯定都是可以同时测7色，只是补偿大小而已。就像ECD和PE、PC5之间虽然补偿大，但还是可以做的。

niwanmao

lgfffancy 发表于 2017-9-12 22:07
不好意思，老师我还想问一下如果某一荧光素分子都能被488和640nm的激光激发，那么他们的光路是不是相同的 ...

首先，我觉得这类荧光素存在的可能性小，其次即使能被两个波长的激光同时激发，也有主次之分。

我想成大牛

不同的激发光对应有不同的检测通路，你可以理解为不同激发光激发出来的荧光走不同的路，即使路上收费站（滤镜）是一样的，但是他们是不会过两条路上的两个收费站的，只过一个（当然实际是会有较大补偿的），可以同时染。