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[流式相关软件] 分析数据时裸细胞在fitc通道有疑似分群?考虑什么原因?

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发表于 2017-10-14 10:00:40 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
新手提问,请各位老师帮忙答疑解惑!

如图,在做外周血PBMC流式细胞分析时,裸细胞在fitc通道有疑似分群,目的细胞(样本)在fitc通道有较明显分群,考虑什么原因?根据这样的结果,是否能够得出我的目的细胞的确在fitc通道有分群?还是假阳性?

裸细胞在fitc通道疑似分群

裸细胞在fitc通道疑似分群

目的细胞群在fitc通道也有分群

目的细胞群在fitc通道也有分群
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发表于 2017-10-14 15:53:36 | 显示全部楼层
空白管这不叫分群,这些信号可能是非特异性粘附
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 楼主| 发表于 2017-10-15 00:03:03 来自手机 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-10-14 15:53
空白管这不叫分群,这些信号可能是非特异性粘附

那老师您看我的样本目的细胞管分群了吗?还是也是非特异性粘附?因为位置看着一样…
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发表于 2017-10-15 10:05:24 | 显示全部楼层
zhangyy 发表于 2017-10-15 00:03
那老师您看我的样本目的细胞管分群了吗?还是也是非特异性粘附?因为位置看着一样… ...

我平时判断非特异性染色不会只看一个通道,而是综合FSC、SSC的位置,以及其它特异性标记的表达,尤其是多色流式,有时候在一个通道发生的分群,很可能是另一个通道的补偿没有调节好,必须要谨慎谨慎再谨慎。
因为我不知道你的方案搭配如何,原始数据如何,所以无法给你明确的答复,但你可以按照前面所讲的思维方式去分析试试!
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发表于 2017-10-16 15:17:17 | 显示全部楼层
别的荧光通道也看下,可能是自发荧光
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 楼主| 发表于 2017-11-8 15:31:44 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-10-15 10:05
我平时判断非特异性染色不会只看一个通道,而是综合FSC、SSC的位置,以及其它特异性标记的表达,尤其是多 ...

倪老师,我其他通道的确是有明显分群,但我不知道1通道的分群是不是其他通道漏过去的,您说要综合看,我还是有点不太明白。
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 楼主| 发表于 2017-11-8 15:33:09 | 显示全部楼层
a86856635 发表于 2017-10-16 15:17
别的荧光通道也看下,可能是自发荧光

别的通道的确是有明显分群的,因为我染了4个色,其中三个色都是有明显分群(染的是CD3、CD8分子),所以还是不知道1通道是不是漏过去的
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发表于 2017-11-9 08:13:46 | 显示全部楼层
zhangyy 发表于 2017-11-8 15:31
倪老师,我其他通道的确是有明显分群,但我不知道1通道的分群是不是其他通道漏过去的,您说要综合看,我 ...

意思是你如果跟其它抗体一起染色,那边把散点图的另一个坐标调节为其它参数,逐一看过去。
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