加钙处理细胞后，再加Annexin V检测凋亡会有很大的影响吗？

慢小慢 · 发表于 2017-10-15 16:49:41

本帖最后由慢小慢于 2017-10-15 16:52 编辑

因实验需要，要在细胞培养液中加一定浓度的CaCl2，用此含钙的培养液培养一定时间后，检测该细胞的凋亡状态，在此有个疑问想问下老师，Annexin V是一种钙依赖性的蛋白，细胞在加钙处理后，会不会出现部分Annexin V会与胞外的钙离子结合，由此对Annexin V与PS的结合会不会产生较大的影响？？这样还可以用Annexin V的试剂检测凋亡吗？烦请老师的解答，谢谢。

niwanmao · 发表于 2017-10-15 20:11:53

Annexin V的Binding Buffer本身就含钙离子，所以钙离子不是阻碍Annexin V结合，而是帮助。

不过，不管如何，本来就在染色之前需要将培养基洗干净的，所以我觉得无论里面包含了啥东西，都不需要担心。

慢小慢 · 发表于 2017-10-16 14:33:47

niwanmao 发表于 2017-10-15 20:11
Annexin V的Binding Buffer本身就含钙离子，所以钙离子不是阻碍Annexin V结合，而是帮助。

不过，不管如何 ...

好的，十分感谢老师！

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[结构和原理] 加钙处理细胞后，再加Annexin V检测凋亡会有很大的影响吗？