流式检测ROS

小浣熊L77

老师，请帮忙看一下流式检测ROS的结果。我用的是sigma的DCFH-DA试剂。下面是我做的结果，第一张是blank组，第二张是处理组。我这样圈门对吗？

处理组的荧光强度是不是不够，最后统计是用P1那部分还是红色的P2那部分吗？

blank

处理组

niwanmao

小浣熊L77 发表于 2017-11-3 10:02
好的，谢谢老师。最近应该是做出来了。想请问一下老师。我该用什么统计呢？mean FITC吗？我有三个组：neg ...

可以百分比，也可以GeoMean

ghqiu09

你这细胞都死了吧？

小浣熊L77

ghqiu09 发表于 2017-10-23 10:59
你这细胞都死了吧？

做了好多次都是这样，你有详细的步骤吗？可以发一份吗。非常谢谢。还有就是我们怎么判断哪一群细胞是比较好的呢？新手上路，全都不懂

ghqiu09

小浣熊L77 发表于 2017-10-23 11:17
做了好多次都是这样，你有详细的步骤吗？可以发一份吗。非常谢谢。还有就是我们怎么判断哪一群细胞是比较 ...

没有说明书吗？按照说明书做就可以了啊，我都是三四年前做过几次，早忘了

小浣熊L77

ghqiu09 发表于 2017-10-23 11:46
没有说明书吗？按照说明书做就可以了啊，我都是三四年前做过几次，早忘了 ...

sigma的买来就没有说明书，所以一切都靠看文献来摸索，但具体的上机检测时流式的都不会，不知道怎么圈门，用什么统计

ghqiu09

小浣熊L77 发表于 2017-10-23 14:43
sigma的买来就没有说明书，所以一切都靠看文献来摸索，但具体的上机检测时流式的都不会，不知道怎么圈门 ...

你自己上机的吗？我感觉你电压没调好啊，好些细胞都压线了，还有你这是什么细胞？给我感觉你本身细胞状态可能就不太好，第一张图应该是没处理过的细胞吧？怎么还会分两群呢？

小浣熊L77

ghqiu09 发表于 2017-10-23 16:28
你自己上机的吗？我感觉你电压没调好啊，好些细胞都压线了，还有你这是什么细胞？给我感觉你本身细胞状态 ...

对，我自己上机，没有人会。是骨髓间充质细胞，第一张图是没有处理过的。我跑出来都是这样，细胞状态好的反而是两群，处理了的一群（H2O2处理的）。细胞压什么线，不明白？还想请问一下，做这个实验该怎么分组呢？我的这样对吗，blank组（不处理不加探针），阴性对照组（不处理加探针），实验组（处理加探针）。非常谢谢您能回复我

ghqiu09

分组应该是没问题的，如果分群不明显的话，也可是试试用Mean值来说明，这个分群不明显。

niwanmao

小浣熊L77 发表于 2017-10-23 17:16
对，我自己上机，没有人会。是骨髓间充质细胞，第一张图是没有处理过的。我跑出来都是这样，细胞状态好的 ...

有没有试过刚分离出的骨髓间充质细胞？从FSC/SSC散点图看，总觉得这类细胞不太对劲，不像活的，因此导致的结果也是不准确的。