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再谈对照,实战技巧教你如何选择对照确定真阳性比例

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发表于 2017-11-7 19:20:28 | 显示全部楼层 |阅读模式

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对于抗体,我们当然希望它能够只通过抗原-抗体特异性结合的方式,结合到特定的点位,然而,世事难料,完美的事情总是不存在的。

抗体与细胞的结合,除了特异性结合之外,还存在与细胞表面Fc受体的“伪特异性”结合,以及通过两个分子之间的离子和疏水相互作用(“粘性”)而发生的非特异性结合。要实现可靠地定量抗原表达情况,排除后两者十分重要。 因此,适当的对照在流式细胞术中是必不可少的,以确定背景荧光和/或背景染色,从而区分假阳性和真阳性。

做一个流式实验,设置对照建议按照以下步骤进行:
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参考文献:
Eur. J. Immunol. 2017. 47: 1584–1797 Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies

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