正确调整电压

鑫鑫点灯灯

请问各位老师上样检测多色方案，怎样正确调整电压和补偿，具体步骤如何操作，有视频最好了，谢谢！

niwanmao

你这个太笼统了，首先你要做什么检测？然后上机调整电压和补偿，都是需要根据样本区别对待的

鑫鑫点灯灯

niwanmao 发表于 2017-11-15 15:54
你这个太笼统了，首先你要做什么检测？然后上机调整电压和补偿，都是需要根据样本区别对待的 ...

做PBMC，染表型和胞内因子。如CD3，CD16，CD56,CD4,CD8,IFN-y,IL-17A,IL-4,IL-13

robert1988

鑫鑫点灯灯 发表于 2017-11-15 16:09
做PBMC，染表型和胞内因子。如CD3，CD16，CD56,CD4,CD8,IFN-y,IL-17A,IL-4,IL-13

我的理解是，理论上每次染色的结果都不一样，需要用单色样本之类的调节各种参数，以达到最佳状态。实际上很多部门就一批抗体调节一次，也不是不可以，不过最开始的设置需要很仔细。

niwanmao

鑫鑫点灯灯 发表于 2017-11-15 16:09
做PBMC，染表型和胞内因子。如CD3，CD16，CD56,CD4,CD8,IFN-y,IL-17A,IL-4,IL-13

不知道你究竟是直接做9色方案还是分成两管？

如果做9色，上机调节电压的原则，就是使各通道的阴性群都能出来，由于你这里面涉及到4个胞内因子，所以我个人的建议是：购买9个不同荧光素的CD3，单染一下，一方面可利用PBMC里面的单核细胞调节CD3－群体的位置，使电压调到最佳，其次，可利用CD3单染调节各通道的补偿。这样最简单。

guanyu

有些实验不需要调补偿，药具体点

苏沁沁

我觉得CD3分群明显、可用CD3+其他几个因子的同型对照、调整电压、然后上其他单染、调整电压就好