CFSE然后流式上机检测问题

lypzy1221 · 发表于 2017-12-28 14:02:06

倪老师，您好，今天做了一个实验，CFSE染色的细胞再染胞外PE染料的样本上机检测Calibur补偿调不下去，FL1与FL2区分不开，后又尝试在C6流式细胞仪上机，同样的问题，FL1与FL2区分不好。我想咨询您一下，CFSE是不可以与PE染料共染，流式上机检测不？
因为今天是预试验，调补偿等操作一直不能成功，所以我们有保存原数据，没有图片。。。

niwanmao · 发表于 2017-12-28 14:02:07

可以同时染，但是确实存在补偿无法调节到位的Bug，你可以选择其它荧光素，尽量远离CFSE的发射光谱。

ghqiu09 · 发表于 2017-12-28 16:08:25

两个是可以同时染的，CFSE类似于FITC。

lypzy1221 · 发表于 2017-12-30 08:04:34

ghqiu09 发表于 2017-12-28 16:08
两个是可以同时染的，CFSE类似于FITC。

我们也染过，用C6那种傻瓜机器勉强还能调，但是Calibur就不行了。。。

lypzy1221 · 发表于 2017-12-30 08:06:08

niwanmao 发表于 2017-12-28 14:02
可以同时染，但是确实存在补偿无法调节到位的Bug，你可以选择其它荧光素，尽量远离CFSE的发射光谱。 ...

是的，我之前和PE的CD4同时染，在C6上可以区分开，可能与CD4的强表达有关系，我现在染的是PE没那么强表达量也只有10%左右的，好像调不开，严重漏光

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[标本处理] CFSE然后流式上机检测问题

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