样品是否需要刺激或者加BFA

ghqiu09 · 发表于 2017-12-29 17:04:32

荷瘤小鼠，打了蛋白药，想看看PBMC中CD4或CD8细胞的胞内因子的表达情况，比如IFNg之类的。那采血之后，需要加刺激或者BFA吗？谢谢

niwanmao · 发表于 2017-12-31 22:35:06

如果你想直接看，那么可以直接收集后检测IFN-g。
那些体外刺激的是想看T细胞的功能。

ghqiu09 · 发表于 2018-1-2 08:32:35

niwanmao 发表于 2017-12-31 22:35
如果你想直接看，那么可以直接收集后检测IFN-g。
那些体外刺激的是想看T细胞的功能。 ...

那需要加BFA阻断吗？

niwanmao · 发表于 2018-1-2 15:17:25

ghqiu09 发表于 2018-1-2 08:32
那需要加BFA阻断吗？

刺激后的需要用BFA阻断。

毛豆24821 · 发表于 2018-7-30 11:30:40

niwanmao 发表于 2018-1-2 15:17
刺激后的需要用BFA阻断。

不好意思，BFA是什么？

phstudy · 发表于 2018-7-30 14:42:40

Brefeldin A 是一种细胞内蛋白质转运抑制剂。孵育细胞时添加 Brefeldin A 可阻断蛋白质向高尔基氏复合体 (GC) 的转运并导致蛋白质在内质网 (ER) 中蓄积。

毛豆24821 · 发表于 2018-8-3 12:17:18

phstudy 发表于 2018-7-30 14:42
Brefeldin A 是一种细胞内蛋白质转运抑制剂。孵育细胞时添加 Brefeldin A 可阻断蛋白质向高尔基氏复合体 (G ...

非常感谢

hellzhu · 发表于 2020-1-22 07:43:25

niwanmao 发表于 2018-1-2 15:17
刺激后的需要用BFA阻断。

倪老师您好！我查文献BFA有一定的细胞毒性。请问应该在检测点之前多少小时加进去比较合适呢？？谢谢！

niwanmao · 发表于 2020-1-22 09:05:56

hellzhu 发表于 2020-1-22 07:43
倪老师您好！我查文献BFA有一定的细胞毒性。请问应该在检测点之前多少小时加进去比较合适呢？？谢谢！ ...

和刺激剂一起加。

多纳泰罗豪 · 发表于 2020-6-9 16:39:40

老师您好，我看文献中都是刺激结束前的一小时加，BFA提前加会对细胞有大的影响吗

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