多中心研究，应该如何做才能使室间差异最小？

niwanmao

流式细胞术可以检测参与病理免疫过程的各类细胞表面、胞内各类分子信号，非常强大，不仅可揭示病理机制，还有助于药物研发。尽管如此，实验室之间的室间差异，仍是限制流式细胞术应用于多中心研究最重要的一个因素。无论是国内还是国外，室间质控最担心的也是这个。

为此，荷兰、加拿大、美国、比利时、意大利、西班牙等国的协作组进行了小样本测试。他们从3名健康人外周血中分离出PBMC（外周血单个核细胞），在中心实验室经PMA和离子霉素刺激后，进行固定、冷冻，接着运送到7家国际协作实验室。破膜、染色则由各家实验室独立完成，每例样本重复三次。

设门和分析方法分为三种：
- local gating with a local strategy (LGLS)，即本地实验室用自己的策略设门
- local gating with a central strategy (LGCS)，即本地实验室用中心统一的策略设门
- central gating (CG)，由中心实验室统一设门和分析

其中中心实验室采用的设门方法如下图，主要是分析CD3＋比例、CD4＋T比例、CD8＋T比例，以及IL-17A、IFN-g等因子刺激前后的比例：



结果发现，LGLS法CV值4.4～102.1％，LGCS法CV值10.9～65.6％，而CG法CV值仅1.8～20.9％，详细统计结果见下图：


因此，建议在多中心临床试验中，采用中心实验室统一设门和分析方法，会更有助于结果的一致性。


参考文献
Westera L, et al. Centrally Determined Standardization of Flow Cytometry Methods Reduces Interlaboratory Variation in a Prospective Multicenter Study. Clin Transl Gastroenterol. 2017 Nov 2;8(11):e126. doi: 10.1038/ctg.2017.52.

免费全文链接：https://www.nature.com/articles/ctg201752