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流式细胞术是一项可以快速检测大量单细胞多参数的技术,在免疫学中需要越来越多的参数来区分不同免疫细胞群体并研究其生物学性质,然而,受到仪器光路设计的限制,每台仪器可用的荧光通道数量是有限的。因此,很多FLOWER要么就那几个通道分析较少的细胞群体,要么分开多管染色,每管之间有多个重复的系列标记,这两种方法均有问题,前者会使得获取的信息量明显减少,后者会存在管与管之间的误差,并且患者样本有限时比较麻烦。
美国的Francesco Boin等人在2017年12月份的Plos ONE上给我们带来了2色7个系列特异性抗体的染色方案,可以用尽可能少的通道确定出常见的免疫细胞群体——CD4 + T细胞,CD8 + T细胞,γδT细胞,B细胞,NK细胞和经典单核细胞,剩下的其它通道就可以留给需要的检测标记了。
来,逐步讲解。
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