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[标本处理] PI标记PBMC细胞进行流式检测,分析死细胞比例,但是未出...

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发表于 2018-1-22 11:00:44 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
本帖最后由 lilizhou 于 2018-1-22 15:26 编辑

实验步骤:
称取1mg的PI,加入1ml PBS溶解,得到1mg/ml母液。分装4℃避光保存。待检测细胞用PBS洗两次(106cells),最后的细胞沉淀用0.5mlPBS溶液重悬,加入5ul 的PI母液,300目筛网过滤后上样检测(5min内进行上机检测),PI是使用PE通道进行流式检测。
结果如下:
图一:所有细胞样本散点图;图二:未加PI的对照组;图三为加入PI以后。没有明显的细胞分群,而且大部分细胞全部被标记上。这种结果是否正常??

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2.jpg
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最佳答案

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刚刚前面另一个帖子里面那位站友问过。你的工作液浓度太高了,染死活PI一般用10ug/ml,取5-10ul加入100ul样本中,染色1分钟即可。
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发表于 2018-1-22 11:00:45 | 显示全部楼层
lilizhou 发表于 2018-1-22 15:18
好的,好的,知道了,谢谢

刚刚前面另一个帖子里面那位站友问过。你的工作液浓度太高了,染死活PI一般用10ug/ml,取5-10ul加入100ul样本中,染色1分钟即可。
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 楼主| 发表于 2018-1-22 11:01:45 | 显示全部楼层
可以看到结果图片吗,我复制到里面,但是发表后没有看到呢
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发表于 2018-1-22 14:20:40 | 显示全部楼层
lilizhou 发表于 2018-1-22 11:01
可以看到结果图片吗,我复制到里面,但是发表后没有看到呢

呃,论坛编辑器不是Word,不能复制粘贴:)

你现在点击“编辑”按钮,就可进入高级编辑模式,此时,再点击工具栏上的图片按钮,上传图片文件。
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 楼主| 发表于 2018-1-22 15:18:48 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-1-22 14:20
呃,论坛编辑器不是Word,不能复制粘贴:)

你现在点击“编辑”按钮,就可进入高级编辑模式,此时,再点 ...

好的,好的,知道了,谢谢
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 楼主| 发表于 2018-1-23 09:03:27 | 显示全部楼层
本帖最后由 lilizhou 于 2018-1-23 09:05 编辑
niwanmao 发表于 2018-1-22 15:38
刚刚前面另一个帖子里面那位站友问过。你的工作液浓度太高了,染死活PI一般用10ug/ml,取5-10ul加入100u ...

好的,谢谢老师,我是工作液浓度了算错了,把10ug/ml直接当做工作浓度了
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