流式CTC分选的问题

melodysz

各位大神，我想做个流式分选CTC的验证，用健康人血加已知的细胞系，求问有没有人有血样上机前的处理步骤？
参考文献等资料啥的也有就最好啦，万分感谢！

另外问下，流式分选CTC是不是灵敏度不够高，最低的检测限太高了，所以CTC太少就无法检测到？

liuruiluna

血样就是密度梯度离心得到PBMC就好了哦，或者红细胞裂解液去除红细胞。然后对PBMC和细胞系进行计数，比如1x10^7的PBMC加入1x10^5的细胞系，用特异性抗体标记（比如CD45/ Epcam） 。到了你做实验的时候，结果如何很大程度上依赖于这份样本的情况，因为一般都是患者血液，有的人样本CTC含量多 ，有的含量少，这个不是方法能决定了。 一般会对血样先进行血液细胞的去除（比如CD45+细胞的去除，进行富集），这样能提高一些CTC的 相对百分比，在流式上看得更容易细一些。
附了一篇文献