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一个科研实例,告诉你为什么克隆号对实验结果如此重要

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发表于 2018-3-7 19:47:15 | 显示全部楼层 |阅读模式

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4-1BB是与NF-κB介导的存活信号传导相关的TNFR家族成员。 4-1BB广泛表达于免疫系统的活化细胞,包括活化的T细胞、NK细胞和树突状细胞,其配体4-1BBL在活化的抗原呈递细胞上瞬时表达,在活化的T细胞上以低水平表达。
尽管4-1BBL缺陷的小鼠清楚地证明了4-1BBL在CD8T细胞对诸如流感病毒的病毒反应中的作用,但4-1BBL在感染小鼠后可能难以检测。
Mbanwi Achire N对此现象进行了深入研究,发现可能是由于LPS活化骨髓衍生的小鼠树突状细胞后,内源性4-1BB和4-1BBL发生构象上相互作用,从而掩盖其检测,故对4-1BBL表达的测量的影响。 进一步验证发现,克隆号为TKS-1的4-1BBL抗体检测不到感染后小鼠的4-1BBL,但克隆号为19H3的抗体却可以。 屏幕快照 2018-03-07 下午7.10.10.png
图片 1.png

因此,在研究病毒感染或LPS活化小鼠树突细胞的4-1BBL时,建议优先选用19H3克隆号的抗体。
那么平时如何选择正确的抗体呢?首先建议根据你的课题需要,搜索相关文献,参考文献中选择的克隆号,其次,尽可能利用一些公开的抗体数据库,根据抗体克隆号搜索该抗体结合位点的信息,与自己课题联系综合选择。

文献源:Mbanwi Achire N,Lin Gloria H Y,Wang Kuan Chung et al. Constitutive interaction between 4-1BB and 4-1BBL on murine LPS-activated bone marrow dendritic cells masks detection of 4-1BBL by TKS-1 but not 19H3 antibody.[J] .J. Immunol. Methods, 2017, 450: 81-89.




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