凋亡PI的荧光

胖连喵

请问下，最近遇到一个问题，之前一直做凋亡，用的BD的试剂盒，Annexin V/PI双染，然后散点图通过FITC和PE两种染料看，操作过程中需要调节补偿。偶然间，老师说，这个机器是可以吧PE和Percp-Cy5.5分开的，用FITC和Percp-cy5.5这两个组合来看~~也就是说，Percp-Cy5.5更接近于PI染料的发射光吗？麻烦各位老师指点了

robert1988

话不多说，看图吧。


你可以看到，PE和PerCP-Cy5.5通道都能接收到PI的光，不过具体哪个更好取决于你们配的Filter。
可以用这个网址查询：https://www.bdbiosciences.com/us/s/spectrumviewer

niwanmao

PI和PERCP-CY5.5的补偿会比较难调，谨慎使用。

robert1988

niwanmao 发表于 2018-3-15 20:24
PI和PERCP-CY5.5的补偿会比较难调，谨慎使用。

他意思好像是用PerCp-Cy5.5收PI，然后另一个通道用FITC，这样基本上不用补偿，要是用PE通道收PI，补偿比较多

胖连喵

robert1988 发表于 2018-3-14 23:53
话不多说，看图吧。

谢谢您，明白了

胖连喵

niwanmao 发表于 2018-3-15 20:24
PI和PERCP-CY5.5的补偿会比较难调，谨慎使用。

谢谢您~

一丢丢呐

niwanmao 发表于 2018-3-15 20:24
PI和PERCP-CY5.5的补偿会比较难调，谨慎使用。

老师您好，PI补偿比较难调的话，那还是建议用PE和FITC两个通道检测么？看上面发的图感觉PE和FITC的重叠更多呀？

livan724

一丢丢呐 发表于 2018-4-20 16:43
老师您好，PI补偿比较难调的话，那还是建议用PE和FITC两个通道检测么？看上面发的图感觉PE和FITC的重叠更 ...

PE和FITC的补偿好调的，尤其是你做的是凋亡，补偿问题不大的。不用纠结这个问题的。

一丢丢呐

livan724 发表于 2018-4-20 17:11
PE和FITC的补偿好调的，尤其是你做的是凋亡，补偿问题不大的。不用纠结这个问题的。 ...

好的，谢谢！