PBMC流式哪一群才是淋巴细胞

chenjiehitnk · 发表于 2018-3-16 17:09:26

最近检测了很多人的PBMC，PBMC是使用filcoll分离出来的。进行流式检测时，不同的人的样本会看到两种情况，一种只有一群细胞，一种有两群细胞，A群和B群，分别给A群和B群划门，两群细胞里都有CD3、CD4和CD8阳性细胞，而且比例差别不大。到底哪群才是淋巴细胞呢？

niwanmao · 发表于 2018-3-16 17:09:27

chenjiehitnk 发表于 2018-3-17 07:40
老师，是流式染色的影响还是pbmc分离影响的可能性大呢？

Ficoll分离的影响会大一些，红细胞裂解液还好的。

niwanmao · 发表于 2018-3-16 18:28:27

分成A、B两群的，可能还是处理时影响造成FSC变化，应该算一群

chenjiehitnk · 发表于 2018-3-16 18:34:37

是流式染色的影响还是pbmc处理影响的可能性大呢？

chenjiehitnk · 发表于 2018-3-17 07:40:36

niwanmao 发表于 2018-3-16 18:28
分成A、B两群的，可能还是处理时影响造成FSC变化，应该算一群

老师，是流式染色的影响还是pbmc分离影响的可能性大呢？

loisen · 发表于 2018-3-17 10:26:21

一般分离PBMC处理会影响；固定破膜的步骤也会有影响。

lionmilk · 发表于 2019-1-5 16:09:53

niwanmao 发表于 2018-3-16 17:09
Ficoll分离的影响会大一些，红细胞裂解液还好的。

选择密度梯度离心还是红细胞裂解，需要考虑哪些因素呢？谢谢！

niwanmao · 发表于 2019-1-5 17:01:50

lionmilk 发表于 2019-1-5 16:09
选择密度梯度离心还是红细胞裂解，需要考虑哪些因素呢？谢谢！

一般都建议红细胞裂解，除非时间太空

其实是这样，如果你要提取出单个核细胞冻存起来，一段时间后统一检测，是需要用Ficoll的，如果能够随时检测，还是建议用红细胞裂解液。

lionmilk · 发表于 2019-1-9 20:22:33

niwanmao 发表于 2019-1-5 17:01
一般都建议红细胞裂解，除非时间太空

其实是这样，如果你要提取出单个核细胞冻存起来，一段时间后统 ...

明白了，谢谢！分离PBMC确实耗时间

bibottll · 发表于 2019-1-9 21:27:30

niwanmao 发表于 2019-1-5 17:01
一般都建议红细胞裂解，除非时间太空

其实是这样，如果你要提取出单个核细胞冻存起来，一段时间后统 ...

请问冻存起来的PBMC会对淋巴细胞的亚群分析有影响吧？如果冻存时间太久的话

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