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选靠谱抗体,3招足矣

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发表于 2018-4-23 20:51:14 | 显示全部楼层 |阅读模式

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1982年开始,人类白细胞分化抗原国际研讨组开始对不同的分化簇抗原(CD)进行分类,到现在已经有超过370种CD分子。每种分子会有不同厂家生产出不同克隆号的抗体,或者不同荧光素的抗体。
正是由于抗体越来越多,所以在前天第12次线下聚会时,有站友提出了这么一个问题:
流式抗体有很多公司卖,如何选择,万一买到假的抗体怎么办?

非常现实的问题。无论是临床上还是科研中,大家碰到最痛苦的是,我怎么样才能找到一个靠谱的抗体?

谈谈个人感想,给出3招,供参考,如果你们有更好的建议,可留言补充。

1、找与你研究或检测相关的参考文献中的抗体,例如之前我们连载过的OMIP(http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... &action=view&ctid=6),或高影响因子杂志文章。尽量找同一克隆号、同一厂家的。

2、有时候一个克隆号,存在多种荧光素,选哪种?可看一下配图,对比不同荧光素的信噪比,尽量选择信噪比高的荧光素,当然也要适合自己的方案配色。一般说来,几个大的抗体厂家,数据配图还是真实的。
屏幕快照 2018-04-23 下午8.47.28.png

3、即使通过上述两个方式拿到好抗体,也需要进行滴定,确定最佳浓度,同时可验证出该抗体的效果。
抗体滴定详细步骤参考论坛以前的精华帖:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5746-1-1.html



通过这几步,应该就能选到靠谱的抗体,尤其是最后一步验证尤为重要,一旦有问题,及时退货。所以这里提一句,靠谱的代理商也很重要,碰到踢皮球的代理商也很痛苦的。
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发表于 2018-4-25 14:03:53 | 显示全部楼层
本帖最后由 happyeday 于 2018-4-25 14:19 编辑

倪老师好!按照方法2,我们是应该选哪种荧光素的抗体呢?感觉在细胞量大的情况下,标FITC的抗体分群清楚,是不是这个好?
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 楼主| 发表于 2018-4-25 17:31:09 | 显示全部楼层
happyeday 发表于 2018-4-25 14:03
倪老师好!按照方法2,我们是应该选哪种荧光素的抗体呢?感觉在细胞量大的情况下,标FITC的抗体分群清楚, ...

每种抗体,不同荧光素分群效果不同。只要分群好就可以。
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发表于 2018-4-27 14:39:01 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-4-25 17:31
每种抗体,不同荧光素分群效果不同。只要分群好就可以。

那上面例子中的三个抗体都可以用吗?
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 楼主| 发表于 2018-4-27 17:31:51 | 显示全部楼层
happyeday 发表于 2018-4-27 14:39
那上面例子中的三个抗体都可以用吗?

是的。不过我跟你一样,可能会倾向于FITC这个。
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发表于 2018-4-28 16:09:48 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-4-27 17:31
是的。不过我跟你一样,可能会倾向于FITC这个。

非常感谢您!
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