请教，MPO染色

luqhcolalove

请教倪老师，白血病分型里，胞内染色的方法，另外问一下，胞内CD3检测是不是可以直接用CD3单抗标记，可以用的话，怎么样和胞膜表面的CD3分开，谢谢

niwanmao

1、我目前是用CALTAG的FIX & PERM来做的，A液先固定表面抗原10分钟，然后洗涤1-2次，再加入B液，作用5分钟，然后加入MPO等胞内标记，作用15分钟以上，最后洗涤1-2次。
2、胞内的CD3我目前也是跟表面标记用一样的，因为我们先用A液固定过，所以再进行破膜、染色的时候，表面基本上就染不上了。不过这也跟CD3针对的位点有关，你使用的CD3一定要有针对其胞内片段的结合位点，这可以看说明书。

aninawang

我们的方法和nilaoshi类似，先标细胞表面，PBS洗，固定15min，PBS洗，穿膜5min，加胞浆抗体，避光孵育10min