吖啶橙测自噬时使用的浓度问题

lyowensafin

各位老师好！我查文献的时候看到，吖啶橙测自噬的时候，用PBS溶解后的终浓度大致在5μg/ml至0.5μg/ml之间，我曾使用终浓度5μg/ml的吖啶橙检测了HUVEC的自噬情况，结果较为理想，但是接下来的实验我用相同终浓度的吖啶橙测eahy926的时候，电压很高，上机的工作人员告诉我那是由于燃料浓度太高了，只能人为地把电压降下来，后来我又尝试了0.5μg/ml，电压还是很高，今天我再尝试了0.1μg/ml，结果还是不理想，这已经低于文献报道的最低终浓度了，因为细胞的不用吖啶橙使用的浓度会有那么大的差异吗？请问各位老师帮我分析一下造成这种问题的可能原因，谢谢老师！

niwanmao

吖啶橙的标准操作流程请参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... 1&extra=#pid572
应该说，如果浓度降了这么多，荧光还是这么强，那么浓度肯定不是问题，问题肯定在电压调节上。不知道你们检测时是不是使用FL1和FL3？倍增是不是调节为Lin了？
最好能传几个图上来，就更清楚了。