BrdU与PI双染的圈门问题

kobe327292007

最近做的BrdU与PI双染，G1/G2/S期不知道如何圈门合适。有如下问题想要请教：1.control组与给药组细胞的S期Brdu的荧光强度不一致，给药后S期要降低，按照control圈门还是给药组圈门呢？调完补偿后，G1和G2群仍然不在一条水平线，S期是否可以圈多边形门？

2.给药后G1与G2分解不清楚，G1与G2的门如何界定？

niwanmao

染色非常漂亮。
对于这样分群清楚的，就应该按照分群来分，因为可能是你染色的时候细胞密度、染料浓度有所差异，所以最后的位置会有所变化。
因此，直接按分群来，如下图：

kobe327292007

niwanmao 发表于 2018-6-7 13:45
染色非常漂亮。
对于这样分群清楚的，就应该按照分群来分，因为可能是你染色的时候细胞密度、染料浓度有所 ...

感谢倪老师的回复。我还想请教两个问题：1.如果这两组数据需要比较，门画得不一样，这样可以吗？2.这两组是相同的细胞，细胞计数和染色方案都相同，给药组S期染色一直很低，有时候就在G1和G2中间，是跟给药有关吗，需要加大抗体量吗？

niwanmao

kobe327292007 发表于 2018-6-8 09:14
感谢倪老师的回复。我还想请教两个问题：1.如果这两组数据需要比较，门画得不一样，这样可以吗？2.这两组 ...

门的位置微调，这是允许的，因为你这些数据是分群非常清楚的。如果分群不清楚随意调节，就不行了。
至于给药组的S期BrdU偏低原因不明，因为不知道你的实验方案和具体药物，也不知道你的实验处理中会不会有什么细节上的影响。

kobe327292007

niwanmao 发表于 2018-6-8 11:04
门的位置微调，这是允许的，因为你这些数据是分群非常清楚的。如果分群不清楚随意调节，就不行了。
至于 ...

受益了，谢谢倪老师~~