急急急！流式分选目的细胞太少

羊芈芈

最近在做流式分选小鼠CD4+CD25-细胞的体外增殖实验。但是分选得到的目的细胞只有3x10的五次方，怎么继续做后续的实验呢？后续的实验要用CFSE染色，检测分选后的细胞的增殖。之前做过未分选的小鼠淋巴细胞的增殖，因为细胞数目比较多，在本站参考了一些资料及视频后，关于CFSE染色时间及浓度做了改进之后，体外增殖实验已经成功。当时用的是3x10的6次方的细胞，CFSE终浓度为2uM来染色的。现在细胞数量级都降低了，CFSE染色的终浓度要怎么来控制呢？请各位站友帮帮忙！

ghqiu09

你这个是小鼠哪个组织的CD4细胞，怎么会这么少？难道全部都活化了？

羊芈芈

小鼠脾脏的 分选CD4+CD25-CD45RB+

niwanmao

ghqiu09 发表于 2018-6-25 09:23
你这个是小鼠哪个组织的CD4细胞，怎么会这么少？难道全部都活化了？

毒性应该跟浓度相关性大，而不是总用量。
如果你之前的2uM浓度合适，我个人建议还是继续用这个浓度。